羥基喜樹堿對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎外周血淋巴細(xì)胞增殖及凋亡影響研究.pdf

1、目的: 在體外實(shí)驗(yàn)中，通過比較中藥成分羥基喜樹堿(HCPT)與甲氨蝶呤(MTX)對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者(RA)外周血淋巴細(xì)胞(PBL)增殖及調(diào)亡的影響，探討HCPT對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者PBL的作用機(jī)制。 方法: 1．分離純化淋巴細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。 2．用MTT法檢測與不同濃度(0、0.1、1、5、10、50、100、200μg/ml)HCPT與MTX共同孵育的RA外周血淋巴細(xì)胞，在不同時間(24h、48h、7

2、2h)的吸光度值(A)，計(jì)算細(xì)胞生長抑制率(IR％)。 3．用Annexm v/FITC及碘化丙錠溶液(PI)染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測HCPT與MTX在48h時不同濃度(0、0.1、10、100μg/ml)的細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果: 1．HCPT與MTX對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者PBL增殖均具有抑制作用，均呈時間、劑量依賴關(guān)系，時間、劑量的主效應(yīng)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001)。 2．HCPT與MTX對PBL細(xì)胞

3、增殖的抑制率比較，HCPT優(yōu)于MTX，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001)。 3．HCPT、MTX均可誘導(dǎo)體外培養(yǎng)PBL早期凋亡，并且有劑量依賴關(guān)系，劑量效應(yīng)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。 4．HCPT與MTX作用于PBL的凋亡率比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(p>0.05)。 結(jié)論: 1．HCPT在抑制PBL增殖的作用優(yōu)于MTX。 2．HCPT在誘導(dǎo)PBL凋亡的作用與MTX相當(dāng)。 3．HCPT有可能在