大鼠心死亡供體肝臟熱缺血線粒體損傷的研究.pdf

1、目的：
　　 線粒體作為細(xì)胞器,是真核細(xì)胞活動的主要供能單位,線粒體是細(xì)胞發(fā)生呼吸作用的主要場所。線粒體氧化磷酸化的電子傳遞鏈,又叫線粒體呼吸鏈,位于線粒體內(nèi)膜上,由四個分子量很大的跨膜蛋白復(fù)合體組成,功能是進行生物氧化并產(chǎn)生能量分子ATP。線粒體功能直接影響組織器官的活性,到目前為止,在肝移植方面沒有很好的供體器官活性判定標(biāo)準(zhǔn)。本研究旨在從大鼠心死亡供體不同熱缺血時間肝臟線粒體形態(tài)及功能方面損傷的變化,探討心死亡供者肝臟活性,

2、為臨床肝移植提供心死亡供體肝臟活性的判定可行性。
　　 方法：
　　 對42例不同熱缺血時間條件下的心死亡大鼠肝臟標(biāo)本進行超薄切片,透射電鏡觀察肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變并攝片。同時每組每個動物切片隨機選擇5個視野,每個視野選取20個線粒體透射電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu)并行Flameng評分進行半定量分析。提取肝臟線粒體,進而運用分光光度法測定呼吸鏈復(fù)合酶IV即細(xì)胞色素C氧化酶(CCO)的活性。單因素方差分析線粒體損傷程度及CCO活性與零點

3、病例變化差異。
　　 結(jié)果：
　　 電鏡下可見,10分鐘內(nèi)肝細(xì)胞無明顯改變,15分鐘之后變化明顯,表現(xiàn)為肝細(xì)胞的腫脹,糖原減少,細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮。至熱缺血60分鐘,但大部分細(xì)胞仍為可逆性變化具有可復(fù)性,只有小部分細(xì)胞表現(xiàn)不可逆損傷。電鏡下觀察線粒體結(jié)構(gòu)損傷,Flameng評分隨著熱缺血時間的延長而增加,半定量分析P值小于0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義,但線粒體的損傷僅限于Ⅲ級,極少部分達到Ⅳ級。線粒體CCO熱缺血60分鐘時才發(fā)生