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1、林可霉素屬于林可胺類抗生素,能有效的抑制革蘭氏陽(yáng)性菌,廣泛應(yīng)用于蜂業(yè)生產(chǎn)中,對(duì)蜜蜂美洲幼蟲(chóng)腐臭病(AFB)有很好的防治效果。為保障消費(fèi)者安全,控制林可霉素在蜂產(chǎn)品中的殘留,迫切需要建立一種靈敏、高效的林可霉素藥物殘留檢測(cè)技術(shù)。基于此,本文建立了可用于蜂蜜中林可霉素殘留檢測(cè)的高效液相色譜紫外檢測(cè)(HPLC/UV)法和高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(LC-ESI-MS/MS)法。 1.蜂蜜中林可霉素殘留HPLC/UV檢測(cè)方法的建立建立
2、了林可霉素在蜂蜜中殘留檢測(cè)的高效液相色譜紫外檢測(cè)(HPLC/UV)法。樣品經(jīng)提取凈化、反相液相色譜分離,用二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)波長(zhǎng)為204nm,流動(dòng)相為硼砂緩沖液(pH5.0):甲醇:乙腈=70:26:4(V/V),流速1.0mL/mim進(jìn)樣量為20μL。用AgilentHypersil BDS-C18250mm×4.6mm色譜柱分離檢測(cè),在優(yōu)化的色譜分離條件下,林可霉素色譜行為良好,藥物的保留時(shí)間在6.9min。在1.0~2
3、0μg·mL-1線性范圍內(nèi),峰面積與添加濃度的線性關(guān)系良好(r2>0.999 93)。在2.5、5.0、10.0μg·g-1 3個(gè)添加水平,林可霉素的平均回收率范圍為93.02±1.22%,日內(nèi)測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1.58%,日間測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1.49%,最低檢測(cè)限75ng·g-1。 2.蜂蜜中林可霉素殘留LC-ESI-MS/MS檢測(cè)方法的建立建立了蜂蜜中林可霉素殘留的高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-E
4、SI-MS/MS)檢測(cè)方法。樣品經(jīng)固相萃取提取凈化、液相色譜分離后進(jìn)行質(zhì)譜分析,在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)下進(jìn)行特征母離子、子離子對(duì)信號(hào)采集。根據(jù)保留時(shí)間、母離子和兩個(gè)特征子離子信息行定性分析,以離子峰度最強(qiáng)的基峰離子m/z126進(jìn)行定量。在1.0~20ng·mL-1線性范圍內(nèi),峰強(qiáng)度與添加濃度的線性關(guān)系良好(r2>0.999 6)。在2.5、5.0、10.0ng·g-1 3個(gè)添加水平,林可霉素的平均回收率范圍為95.1±3.3%,日內(nèi)
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