食品過敏原壓電型免疫傳感快速檢測技術的研究.pdf

1、食品過敏原已成為重要的食品安全隱患，河蝦與花生在世界糧油組織FAO(1995年)報告中被列為八大常見過敏食品之一。目前過敏原檢測方法操作繁瑣，無法滿足快速、簡便、在線檢測的要求。本文以抗原抗體免疫反應和壓電型傳感技術為基礎，建立了食品過敏原的壓電型免疫傳感快速檢測方法。 本文首先通過硫酸銨分級沉淀和等電點沉淀制備了河蝦、花生蛋白，經凝膠色譜及SDS-PAGE分析，確認河蝦及花生的主要致敏組分。將河蝦、花生蛋白分別免疫BALB／C

2、小鼠，獲得河蝦抗體效價為30000，半數抑制率IC50為60ug／mL?；ㄉ贵w效價為10000，IC50為150ug／mL。 免疫傳感方法的研制過程中，選擇1,6-己二硫醇(HDT)-納米金作為自組裝方式。檢測體系的最佳檢測條件為：常溫下15mMHDT包被90min，納米金吸附時間為110min，抗體包被情況為4℃條件下包被3小時，其中河蝦抗體包被濃度為1:6000，花生抗體包被濃度為1:4000，檢測時間為500s。在蛋白濃

3、度為1ug／mL～300ug／mL之間繪制出免疫傳感檢測的標準曲線，其頻率變化趨勢與sauerbrey方程一致。其中河蝦蛋白的最低檢測限為0.03ug／mL，花生蛋白的最低檢測限為0.2ug／mL，具有較高的靈敏度。河蝦抗體傳感器與魚蛋白交叉率較高，花生抗體傳感器與大豆蛋白的交叉率低，實驗結果與ELISA結果一致。對河蝦和花生蛋白在純凈水中作回收實驗，平均回收率在90％～110％之間，重現性實驗的平均變異系數小于15％。對免疫傳感器進行