紫杉醇和吉西他濱對(duì)HNE-,2-細(xì)胞系協(xié)同放射增敏作用的研究.pdf

1、目的：觀察紫杉醇、吉西他濱兩藥聯(lián)合對(duì)鼻咽癌細(xì)胞系HNE2的放射增敏作用，并探討其可能機(jī)制。 方法：采用MTT法測(cè)定紫杉醇及吉西他濱的IC50、IC10值。隨后按不同處理方法將HNE2細(xì)胞分為四組：?jiǎn)渭冋丈浣M、吉西他濱(GE)+照射組、紫杉醇(PA)+照射組及吉西他濱+紫杉醇+照射組(其中吉西他濱及紫杉醇的濃度分別為0.2μg/ml及0.1μg/ml)。用MTT法比較各組用藥4h、8h、24h和48h后聯(lián)合射線照射(6Gy)的細(xì)胞

2、抑制率；用克隆形成實(shí)驗(yàn)計(jì)算兩藥物單用及合用的放射增敏比；流式細(xì)胞儀法分別檢測(cè)、比較各組的細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期變化；Westernblot法測(cè)定各組細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax的表達(dá)水平。 結(jié)果：MTT法測(cè)定吉西他濱的IC50及IC10分別為173.2μg/ml和0.210μg/ml；紫杉醇的IC50及IC10分別為2.73μg/ml和0.13μg/ml。用MTT法分別測(cè)定用藥(紫杉醇0.1μg/ml、吉西他濱0.2μg/m

3、l及兩者聯(lián)合)4h、8h、24h和48h后聯(lián)合射線照射(6Gy)的細(xì)胞抑制率結(jié)果顯示細(xì)胞抑制率隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加，以作用48h后聯(lián)合射線的細(xì)胞抑制率為最高(其中吉西他濱聯(lián)合射線的細(xì)胞抑制率為43.45±5.1；紫杉醇為60.62±5.0；兩者聯(lián)合為77.93±4.7，P均＜0.05)。吉西他濱、紫杉醇及兩者聯(lián)合使用的放射增敏比分別為1.06、1.13和1.34。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示吉西他濱聯(lián)合射線主要誘導(dǎo)S期阻滯(96.03％)，誘導(dǎo)凋亡率

4、為31.62％；紫杉醇聯(lián)合射線引起的阻滯以G2+M期為主(75.71％)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率為44.56％；兩者合用并聯(lián)合射線后G2+M期比例(65.98％)有所下降，同時(shí)S期比例(33.33％)有所上升(與PA+放射組比較)，細(xì)胞凋亡率達(dá)到73.28％。在單純照射組、吉西他濱組、紫杉醇組及聯(lián)合用藥組各組中bcl-2的表達(dá)呈逐步下降趨勢(shì)，而bax的表達(dá)則呈逐步上升趨勢(shì)。 結(jié)論：1、吉西他濱、紫杉醇單用及兩藥聯(lián)合對(duì)鼻咽癌細(xì)胞系HNE2