多西他賽對(duì)食管癌細(xì)胞系EC-9706放射增敏機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 1、在體外觀察多西他賽對(duì)人食管癌細(xì)胞系EC-9706生長(zhǎng)抑制的影響，初步探索多西他賽對(duì)細(xì)胞周期分布的影響及其作用機(jī)制。2、在體外觀察多西他賽及X線聯(lián)合作用對(duì)人食管癌細(xì)胞系EC-9706生長(zhǎng)抑制的影響，探討多西他賽的放射增敏作用及機(jī)制，為食管癌的放射增敏治療提供新的思路和方法。3、通過(guò)RT-PCR檢測(cè)照射后食管癌細(xì)胞系EC-9706Bcl-2基因的表達(dá)情況，探討X線對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制。
　　 方

2、法：
　　 1、用不同濃度的多西他賽處理食管癌細(xì)胞系EC-9706，以集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)多西他賽對(duì)該細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用。2、以0、0.25×10-9、0.5×10-9、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的多西他賽處理細(xì)胞24h、48h、72h后以流式細(xì)胞儀法檢測(cè)細(xì)胞周期分布。3、以10-6mol/L的多西他賽處理細(xì)胞24h，再以6MV-X線0、2Gy照射細(xì)胞，分別于照射后24h和48h以流式細(xì)胞儀法檢測(cè)細(xì)胞細(xì)胞周期

3、的分布。4、以6MV-X線0Gy、4Gy、6Gy作用于細(xì)胞，于1h、6h和24h分別提取細(xì)胞總RNA，以RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞Bcl-2基因的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、多西他賽在體外能抑制EC-9706細(xì)胞的增殖，并呈濃度依賴性。多西他賽可以誘導(dǎo)EC-9706細(xì)胞凋亡和G2/M期阻滯。2、多西他賽可以使細(xì)胞周期阻滯在G2/M期，并呈現(xiàn)出時(shí)間-濃度依賴性。3、2GyX線照射可以解除由于多西他賽處理而引起的G2/M期細(xì)