GJB2單雜合突變非綜合征型耳聾致病機(jī)制的研究.pdf

1、目的:進(jìn)行GJB2單雜合突變非綜合征型耳聾(NSHI)患者的篩選,分析和總結(jié)GJB2單雜合突變患者的基因型與表型及其相互關(guān)系。探討攜帶GJB2單雜合突變NSHI患者GJA1突變情況。探討GJB2單雜合突變NSHI患者GJB2序列是否存在大片段堿基插入或缺失。
　　方法:第一部分:對解放軍總醫(yī)院聾病分子診斷中心的7514例NSHI患者基因診斷的結(jié)果進(jìn)行分析,篩選出GJB2單雜合突變而未查出其他常見耳聾基因突變(如GJB3、GJB6、

2、SLC26A4、mtDNA等)的病例217例,分析GJB2單雜合致病突變類型以及單核苷酸多態(tài)(SNP),總結(jié)臨床特點(diǎn),包括一般資料、聽力學(xué)結(jié)果和顳骨高分辨率CT(HRCT)。聽力學(xué)檢查包括:純音測聽及小兒行為測聽191例、聲導(dǎo)抗74例、聽性腦干反應(yīng)(ABR)60例、耳聲發(fā)射(OAEs)47例、40Hz聽覺事件相關(guān)電位(AERP)35例、聽覺穩(wěn)態(tài)反應(yīng)(ASSR)29例。由于不是每個病例都做全上述檢查,全國流行病學(xué)調(diào)查的病例僅有純音測聽,2

3、6例患者無法配合純音測聽但客觀聽力測試提示為感音神經(jīng)性聾,因此每種檢查的病例數(shù)不相同。第二部分:對205例(12例無DNA標(biāo)本)GJB2單雜合突變NSHI患者進(jìn)行GJA1編碼區(qū)直接測序,對照組為111例聽力正常成年人。第三部分:應(yīng)用長鏈PCR及0.8％瓊脂糖凝膠電泳檢測201例(16例無DNA標(biāo)本)GJB2單雜合突變NSHI患者GJB2全序列長度,對照組同第二部分。
　　結(jié)果:7514例NSHI中篩選出GJB2單雜合突變217例(

4、2.89%,217/7514),男119例,女98例,共篩查出GJB2單雜合致病突變17種,最常見的突變類型為235delC雜合152例(70.05%)、299delAT雜合28例(12.90%)、176del16雜合6例(2.76%),其它突變類型31例(14.29%)。SNP分析:無SNP100例(46.08%),109G>A雜合53例(24.42%),79G>A雜合+341A>G雜合32例(14.75%),79G>A雜合24例(1

5、1.06%),其它類型SNP8例(3.69%)。191例純音測聽結(jié)果:極重度聾132例(69.11%),重度聾25例(13.09%),中度聾25例(13.09%),輕度聾7例(3.66%),正常2例(1.05%);162例(162/191,84.82%)表現(xiàn)為雙側(cè)對稱性聽力下降,29例(15.18%)不對稱;移碼突變176例(92.14%,176/191),其中極重度聾123例(69.89%,123/176),錯義突變13例(6.81%

6、,13/191),無義突變2例(1.05%,2/191)。74例聲導(dǎo)抗結(jié)果:鼓室壓圖為A型102耳(68.92%),As型27耳(18.24%),C型9耳(6.08%),Ad型6耳(4.05%),B型2耳(1.35%)和D型2耳(1.35%);聲反射閾:(80-95)dBHL37耳(25.00%),(96-110)dBHL18耳(12.16%),聲發(fā)射未引出93耳(62.84%);重振48耳(32.88%)。60例ABR結(jié)果:未引出反應(yīng)

7、63耳(52.50%),ABR閾值(30-60)dBnHL15耳(12.50%),(61-90)dBnHL23耳(19.17%),>90dBnHL19耳(15.83%)。35例40HzAERP結(jié)果:1kHz反應(yīng)閾值≤60dBnHL5耳(7.14%),(61-90)dBnHL14耳(20.00%),(91-120)dBnHL35耳(50.00%),>120dBnHL16耳(22.86%)。29例ASSR結(jié)果:ASSR反應(yīng)閾值≤80HLcg

8、8耳(13.79%),(81-119)HLcg38耳(65.52%),≥120HLcg12耳(20.69%)。47例OAEs結(jié)果:87耳(92.55%)OAEs無反應(yīng),7耳(7.45%)不同程度引出反應(yīng)。95例顳骨CT檢查發(fā)現(xiàn)內(nèi)耳畸形3例(3.16%)。205例GJB2單雜合突變患者中,GJA1IVS2+1insA雜合突變3例(1.45%),456G>A和717G>A各1例,都為雜合同義突變。111例對照組中,IVS2+1insA雜合突

9、變3例(2.70%),466A>G雜合突變1例(0.90%)。兩組IVS2+1insA突變率無明顯差異(校正χ2=0.115,P=0.735>0.05)。201例GJB2單雜合突變患者和111例對照組GJB2序列長度檢測均未見明顯異常。
　　結(jié)論:中國GJB2單雜合突變NSHI患者常見的突變類型為235delC雜合、299delAT雜合和176del16雜合,以移碼突變最常見,其基因型相關(guān)的聽力表型多種多樣,臨床表現(xiàn)大多數(shù)為雙側(cè)對