常染色體顯性遺傳非綜合征型耳聾家系基因突變研究.pdf

1、目的：研究一個常染色體顯性遺傳非綜合征型耳聾家系的致病基因，探討其可能的分子遺傳學(xué)機制。
　　方法：采集家系的臨床資料，選取部分家系成員（包括患者9名，聽力正常成員14名）進(jìn)行外周血基因組DNA提取;并取148名無血緣關(guān)系的聽力正常人和53名散發(fā)聾患者樣本作為本研究對照。首先，用耳聾基因檢測芯片對家系先證者進(jìn)行中國人中4種常見耳聾致病基因的9個突變熱點的篩查后，選取3名患者及1名配偶的基因組DNA進(jìn)行全外顯子組測序，得到該家系的候

2、選致聾基因;其次，針對候選致聾基因設(shè)計引物，PCR法擴增目的DNA片斷，所得產(chǎn)物經(jīng)純化后進(jìn)行Sanger測序，測序結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)序列比對，得到與家系耳聾表型共分離的致病基因;最后，在散發(fā)聾患者及無血緣關(guān)系的正常人群中對該基因突變進(jìn)行篩查，排除其為單核苷酸多態(tài)性可能;同時用生物信息學(xué)方法對該基因突變進(jìn)行分析，判斷其致病性。
　　結(jié)果：全外顯子組測序共得到51個候選基因，通過Sanger測序及基因型-表型共分離分析，確定一個新的EYA4基