常染色體顯性遺傳非綜合征型耳聾家系基因突變研究.pdf

1、目的：研究一個(gè)常染色體顯性遺傳非綜合征型耳聾家系的致病基因，探討其可能的分子遺傳學(xué)機(jī)制。
　　方法：采集家系的臨床資料，選取部分家系成員（包括患者9名，聽(tīng)力正常成員14名）進(jìn)行外周血基因組DNA提取;并取148名無(wú)血緣關(guān)系的聽(tīng)力正常人和53名散發(fā)聾患者樣本作為本研究對(duì)照。首先，用耳聾基因檢測(cè)芯片對(duì)家系先證者進(jìn)行中國(guó)人中4種常見(jiàn)耳聾致病基因的9個(gè)突變熱點(diǎn)的篩查后，選取3名患者及1名配偶的基因組DNA進(jìn)行全外顯子組測(cè)序，得到該家系的候

2、選致聾基因;其次，針對(duì)候選致聾基因設(shè)計(jì)引物，PCR法擴(kuò)增目的DNA片斷，所得產(chǎn)物經(jīng)純化后進(jìn)行Sanger測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)序列比對(duì)，得到與家系耳聾表型共分離的致病基因;最后，在散發(fā)聾患者及無(wú)血緣關(guān)系的正常人群中對(duì)該基因突變進(jìn)行篩查，排除其為單核苷酸多態(tài)性可能;同時(shí)用生物信息學(xué)方法對(duì)該基因突變進(jìn)行分析，判斷其致病性。
　　結(jié)果：全外顯子組測(cè)序共得到51個(gè)候選基因，通過(guò)Sanger測(cè)序及基因型-表型共分離分析，確定一個(gè)新的EYA4基