山西省非綜合征型耳聾患者耳聾基因的檢測分析.pdf

1、目的:
　　本課題采用多種檢測技術對非綜合征性耳聾患者的致病基因進行篩查，統(tǒng)計常見基因的突變位點，尋找新的致病基因，為疾病的產(chǎn)前診斷、早期篩查及治療提供依據(jù)；同時也為耳聾基因的診斷提供了更快速、簡便、靈敏的方法。
　　方法:
　　由山西省太原市中心醫(yī)院中心實驗室收集山西省各地區(qū)聾啞學校的耳聾患者標本300例，年齡均在8-23歲之間。納入標準為：除聽力下降以外不伴有其他任何臨床癥狀。通過對患者臨床癥狀，檢驗結果及相關檢查

2、確診并建立資料庫。由患者本人或監(jiān)護人簽署知情同意書后采集外周血。采用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜法對4個常見基因二十個位點進行篩查，并統(tǒng)計突變位點，對未發(fā)生突變的標本選取10例用基因捕獲+二代測序的方法進行檢測，篩選出新的熱點致病基因，并合成相應的引物，用Sanger測序的方法對剩余標本進行檢測，尋找致病突變位點，用100例正常標本作為對照。
　　結果:
　　1．通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜法對300例耳聾患者標

3、本檢測后，有152例發(fā)生突變。
　　2．在剩余的148例標本中選取10例，經(jīng)過基因捕獲+二代測序的方法進行檢測后，有3例發(fā)生TRIOBP基因的突變，2例發(fā)生TPRN基因的突變。
　　3．通過對上述兩個基因的相應外顯子進行引物的設計與合成，對剩余的138例標本用Sanger測序進行檢測，發(fā)現(xiàn)TRIOBP基因中，131例攜帶c.3559 T>C（p.F1187L）,11例攜帶c.3070 C>A(p.P1024 T)的突變，通過

4、正常對照的驗證，c.3559 T>CT可能是SNP位點，而c.3070 C>A在正常對照組中未被發(fā)現(xiàn)，該位點能否導致耳聾，還有待進一步驗證；TPRN基因未見突變。
　　結論:
　　1．GJB2、SLC26A4、GJB3、線粒體DNA這四個基因是山西省耳聾患者的主要致病基因，但各突變位點的攜帶率與全國其他地區(qū)有明顯的差異；
　　2.TRIOBP和TPRN基因的突變與非綜合征性耳聾的發(fā)生有關；
　　3.基質輔助激光解