溫州地區(qū)非綜合征型耳聾基因檢測及家系分析.pdf

1、目的： 1、通過統(tǒng)一的調(diào)查方法、標(biāo)本采集，利用基因診斷方法對我院門診非綜合征型耳聾(nonsyndromichearingimpairment，NSHI)患者及其家系成員進(jìn)行GJB2和線粒體DNA(mtDNA)1555位點突變檢測研究，分析GJB2和mtDNAA1555G基因突變在NSHI發(fā)病中的作用。 2、分析攜帶GJB2和mtDNAA1555G基因突變患者的家系情況及臨床特征，為患者家庭提供準(zhǔn)確的病因?qū)W分析和遺傳咨詢

2、。 方法： 1、收集2006年4月-2007年12月我院NSHI患者家系48個，抽取包括耳聾患者62例及其家庭成員57例共119份外周血液標(biāo)本，其中接受人工耳蝸(cochlearimplant，CI)植入術(shù)的患兒16例； 2、收集相關(guān)臨床資料，并將患者分為小兒組和成人組； 3、對CI植入者在接受耳聾基因檢測前均進(jìn)行顳骨薄層CT掃描及MRI耳蝸水成像； 4、提取所采集血液標(biāo)本的基因組DNA：

3、 5、用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增技術(shù)對所有患者及其家系成員的核基因組和線粒體基因組進(jìn)行擴(kuò)增篩查，對線粒體基因組的PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后進(jìn)行測序分析；對核基因的PCR產(chǎn)物純化后直接進(jìn)行GJB2基因全序列測序分析； 6、對GJB2和mtDNAA1555G基因突變陽性患者家系進(jìn)行系譜分析，為患者家庭提供準(zhǔn)確的病因?qū)W分析和遺傳咨詢。 結(jié)果： 1、在我院收集的48個NSHI家系中檢出16個家系攜帶致聾基因突變，為遺傳性耳聾家

4、系。119份外周血液標(biāo)本中測出35例攜帶致聾基因突變，總檢出率為29.4％，其中GJB2基因突變的檢出率為15.1％(18/119)，8例為235delC純和突變，檢出率為6.7％，10例235delC雜和突變，檢出率為8.4％，235delC等位基因的檢出率為23.5％；mtDNAA1555G突變的檢出率為14.3％(17/119)。 2、48個NSHI耳聾家系的先證者中有15例患者攜帶致聾基因突變，檢出率為31.3％，包括8

5、例(16.7％)為GJB2基因突變，7例(14.6％)為mtDNAA1555G突變；62例NSHI耳聾患者中有22例患者攜帶致聾基因突變，檢出率為35.5％，包括9例(14.5％)為GJB2基因突變，8例為235delC純合子，1例為235delC雜和子，13例(21.0％)為mtDNAA1555G突變。 3、小兒組39例患兒中共檢測到25.6％(10/39)的致聾基因突變，其中8例患兒為(20.5％)為GJB2基因突變，類型均

6、為235delC純和突變，2例(5.1％)為mtDNAA1555G突變。3例有明確氨基糖苷類抗生素(aminoglycosideantibiotics，AmAn)使用史的患兒中檢出2例mtDNAA1555G突變，檢出率為66.7％。12例有耳聾家族史的患兒中檢出4例有明確的致病突變，檢出率為33.3％。 4、成人組23例患者中檢測到52.2％(12/23)的致聾基因突變，其中11例為(47.8％)為mtDNAA15556突變，1

7、例(4.3％)為GJB2基因突變，類型為235delC雜和突變。8例有明確AmAn使用史的患者中檢出4例攜帶mtDNAA1555G突變，檢出率為50％。22例有耳聾家族史，其家系中至少2人罹患耳聾，檢出12例有明確的致病突變，檢出率為54.5％。在檢出有致病耳聾基因的患者家族中均有其他成員患罹患耳聾，攜帶mtDNAA1555G突變者36.4％有明確的AmAn使用史。 5、48個NSHI家系中聽力正常的家系成員血液標(biāo)本共57份，檢

8、測到13例(22.8％)攜帶致聾基因突變，其中9例(15.8％)為GJB2基因突變，均為235delC雜和子，4例(7.0％)為mtDNAA15556突變。 結(jié)論： 1、在我院收集的119份外周血液標(biāo)本中測出35例攜帶致聾基因突變，總檢出率為29.4％，48個NSHI耳聾家系檢出16個家系攜帶致聾基因突變，為遺傳性耳聾家系。48個先證者中有15例患者攜帶致聾基因突變，檢出率為31.3％，其中16.7％為GJB2基因突變，

9、14.6％為mtDNAA1555G突變；62例NSHI耳聾患者中有22例患者攜帶致聾基因突變，檢出率為35.5％，包括14.5％為GJB2基因突變，21.0％為mtDNAA1555G突變。提示本地區(qū)有較高的GJB2基因突變和mtDNAA1555G突變。 2、在小兒組GJB2基因突變、mtDNAA1555G突變的檢出率分別為20.5％、5.1％，而成人組分別為47.8％、4.3％，兩組存在明顯的組間差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義。提示GJB

10、2突變是先天性耳聾的主要原因，mtDNAA1555G突變是后天性耳聾的主要原因。 3、本組數(shù)據(jù)中，示攜帶mtDNAA1555G突變的同一家系和不同家系間母系成員間的發(fā)病年齡、聽力損失程度和耳聾外顯率都不同，表明除mtDNAA1555G突變外，AmAn、核基因和線粒體單體型做為修飾因子參與A1555G突變造成的耳聾表型。 4、耳聾患者致聾基因突變檢出率為35.5％，其家系中聽力正常者致聾基因突變檢出率為22.8％，提示耳聾