Brugada綜合征家系SCN5A基因突變位點的檢測及意義.pdf

1、目的：旨在研究一個中國Brugada綜合征患者家系的SCN5A基因新的突變位點情況。
　　方法：采用DNA抽提試劑盒提取所研究的Brugada綜合征家系中所有成員的外周血DNA，同時依據(jù)國際標準選取200名健康者作為對照組，并提取這些對照者的外周血DNA。選取該家系中的3名Brugada綜合征患者的外周血DNA，然后設計和合成SCN5A基因28對編碼外顯子，并分別對SCN5A基因的28對外顯子進行PCR擴增，然后對擴增產(chǎn)物進行測序

2、，將測序得出的堿基序列結果與正常的SCN5A基因堿基序列結果進行比對，以發(fā)現(xiàn)突變位點。選取該家系中非病患者以及健康對照者的外周血DNA，應用相同的方法對SCN5A基因的28對外顯子進行測序。
　　結果：提取Brugada綜合征患者外周血DNA，并分別對其SCN5A基因的28對外顯子進行測序，然后將測序結果與正常SCN5A基因相應的cDNA進行比對，發(fā)現(xiàn)SCN5A基因第9號外顯子第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G，導致356

3、位的絲氨酸變?yōu)楸彼?S1069A)。進一步對患者SCN5A基因DNA序列第9號外顯子進行正向測序和反向測序，正向測序結果顯示第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G；而反向測序結果顯示相對應的堿基由腺嘌呤變?yōu)榘奏?，反證了SCN5A基因DNA序列第9號外顯子第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G。
　　結論：該Brugada綜合征家系SCN5A基因第9號外顯子上的突變位點（S1069A）可能是其發(fā)生Brugada綜合征的分