Brugada綜合征家系SCN5A基因突變位點(diǎn)的檢測及意義.pdf

1、目的：旨在研究一個(gè)中國Brugada綜合征患者家系的SCN5A基因新的突變位點(diǎn)情況。
　　方法：采用DNA抽提試劑盒提取所研究的Brugada綜合征家系中所有成員的外周血DNA，同時(shí)依據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)選取200名健康者作為對(duì)照組，并提取這些對(duì)照者的外周血DNA。選取該家系中的3名Brugada綜合征患者的外周血DNA，然后設(shè)計(jì)和合成SCN5A基因28對(duì)編碼外顯子，并分別對(duì)SCN5A基因的28對(duì)外顯子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序

2、，將測序得出的堿基序列結(jié)果與正常的SCN5A基因堿基序列結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，以發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)。選取該家系中非病患者以及健康對(duì)照者的外周血DNA，應(yīng)用相同的方法對(duì)SCN5A基因的28對(duì)外顯子進(jìn)行測序。
　　結(jié)果：提取Brugada綜合征患者外周血DNA，并分別對(duì)其SCN5A基因的28對(duì)外顯子進(jìn)行測序，然后將測序結(jié)果與正常SCN5A基因相應(yīng)的cDNA進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)SCN5A基因第9號(hào)外顯子第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G，導(dǎo)致356

3、位的絲氨酸變?yōu)楸彼?S1069A)。進(jìn)一步對(duì)患者SCN5A基因DNA序列第9號(hào)外顯子進(jìn)行正向測序和反向測序，正向測序結(jié)果顯示第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G；而反向測序結(jié)果顯示相對(duì)應(yīng)的堿基由腺嘌呤變?yōu)榘奏?，反證了SCN5A基因DNA序列第9號(hào)外顯子第1069位的堿基由胸腺嘧啶T變?yōu)轼B嘌呤G。
　　結(jié)論：該Brugada綜合征家系SCN5A基因第9號(hào)外顯子上的突變位點(diǎn)（S1069A）可能是其發(fā)生Brugada綜合征的分