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文檔簡介
1、目的:
建立內(nèi)毒素性 ALI大鼠模型,觀察兩種不同濃度姜黃素在不同時間點對內(nèi)毒素性大鼠急性肺損傷形態(tài)學(xué)、氧合、肺組織氧化應(yīng)激及血紅素氧合酶-1( HO-1)表達(dá)的影響。
方法:
分為5組,A組生理鹽水對照組(NS組),B組溶媒二甲基亞砜對照組(DMSO),C組脂多糖造模組(LPS),D組脂多糖造模組+姜黃素100mg/kg處理組(LPS+CUR100mg/kg),E組脂多糖造模組+姜黃素200mg/kg處理
2、組(LPS+CUR200mg/kg),每組按時相點又分為2h、6h及12h,90只大鼠完全隨機(jī)分配到各亞組,每組6只。根據(jù)分組分別于A組注射生理鹽,B組注射DMSO, C組注射LPS,D、E兩組注射LPS及姜黃素。觀察各組大鼠一般狀態(tài)變化,在相應(yīng)時間點抽血查動脈血氣,并于2h、6h、12h分別放血處死大鼠,留取相應(yīng)的肺組織,觀察肺組織大體改變,行HE染色肺組織病理學(xué)檢查,光鏡下觀察并評分,對比觀察各組三個不同時間點的肺濕干重比(W/D)
3、、測定肺組織勻漿中髓過氧化物酶(MPO)的含量、免疫組化法檢測肺組織HO-1蛋白的表達(dá)并行半定量分析及RT-PCR方法檢測肺組織HO-1mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
1.PaO2和PaO2/FiO2的變化:B組與A組比較差別沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組相應(yīng)時間點 PaO2、PaO2/FiO2與 A組比較明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);D、E組PaO2、PaO2/FiO2在6h及12h時間點較
4、C組明顯上升,且以E組6h上升更明顯(P<0.05)。
2.肺組織濕干重比變化:B組大鼠W/D值與A組比較均無明顯變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組相應(yīng)時間點W/D值較A組明顯上升,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);D、E組W/D值在6h及12h較C組下降,且以E組6h組下降明顯,但仍高于A組(P<0.05)。
3.肺組織病理變化及其病理評分情況:大體觀察 A組各時間點大鼠肺臟正常,光學(xué)顯微鏡觀察
5、無明顯異常;B組肉眼及光學(xué)顯微鏡觀察情況大致同A組,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C組肺損傷嚴(yán)重,以12h為甚,C組各時間點病理評分均高于A組(P<0.05);D、E組肺損傷病理改變不同程度減輕,且D、E兩組在2h病理評分較C組無明顯下降(P>0.05),但在6h和12h的病理評分較C組明顯下降(P<0.05),且以E組6h下降更明顯(P<0.05)。
4.肺組織勻漿中MPO活性的變化:B組大鼠各時間點肺組織勻漿MPO活性
6、與A組比較未見明顯變化,兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相應(yīng)時間點中肺組織MPO活性較A組增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);D、E組MPO活性在6h及12h較C組下降,且以E組6h組下降明顯,但仍高于A組(P<0.05)。
5.肺組織免疫組化觀察 HO-1蛋白表達(dá)的變化:B組大鼠各時間點肺組織HO-1蛋白陽性免疫產(chǎn)物與A組比較未見明顯變化,兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相
7、應(yīng)時間點中肺組織HO-1蛋白表達(dá)較A組增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);D、E組HO-1蛋白表達(dá)在6h及12h較C組上升,且以E組6h組上升明顯(P<0.05)。
6.肺組織中HO-1mRNA的表達(dá)情況:B組大鼠各時間點肺組織HO-1mRNA表達(dá)與A組比較未見明顯變化,兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相應(yīng)時間點中肺組織HO-1mRNA表達(dá)較A組增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);D、E組HO-
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