Homer與注意缺陷多動障礙關(guān)系的研究.pdf

1、注意缺陷多動障礙(Attention Deficit Hyperactivity Disorder,ADHD)是兒童常見的神經(jīng)行為問題，發(fā)病率達2.59％～7.25％，嚴(yán)重影響兒童的身心健康和學(xué)習(xí)生活，因此，有關(guān)ADHD的研究一直是兒科學(xué)領(lǐng)域的熱點之一。然而，由于ADHD涉及腦的多個解剖部位及神經(jīng)遞質(zhì)傳遞系統(tǒng)異常，以及以人體為研究對象存在局限性，其相關(guān)研究仍是21世紀(jì)醫(yī)學(xué)難點之一。 Homer 1、Homer 2是本課題組先前通

2、過基因芯片篩選出的差異表達于目前廣泛應(yīng)用的 ADHD動物模型SHR/WKY大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat，SHR/Wistar Kyoto，WKY)前額葉的基因。Homer 1、Homer 2同屬Homer家族成員，各自存在多種不同剪切形式，其編碼的蛋白是新發(fā)現(xiàn)的一類位于突觸后膜的重要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白，主要通過和代謝型谷氨酸受體(group I metabotropic glutamate recep

3、tor，mGluR I)、三磷酸肌醇受體(inositol trisphosphate，IP3R)、Shank等蛋白結(jié)合，在突觸后致密斑的重塑、受體細(xì)胞定位、突觸前后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、突觸形成中起重要作用。因此，提示該基因可能參與到ADHD的病因及發(fā)病機制中，然而國內(nèi)外均未見相關(guān)報道。 本課題分兩部分，通過觀察Homer不同亞型在SHR/WKY大鼠不同腦區(qū)的表達差異情況，以及探討臨床常用藥物-鹽酸哌甲酯(methylphenidate，

4、MPH)對SHR大鼠行為、Homer及其相關(guān)基因mGluR I、IP3R、Shank表達的影響，來闡明Homer與ADHD之間的密切關(guān)系。 本研究是針對注意缺陷多動障礙發(fā)病機制的探索性研究，有利于了解兒童ADHD的神經(jīng)生物學(xué)機制，研究結(jié)果將為ADHD發(fā)病機制及治療機理提供新的線索和理論依據(jù)。 1.Homers不同亞型在SHR/WKY大鼠不同腦區(qū)差異表達的研究目的分析Homers同亞型在ADHD動物模型幼年SHR大鼠，及其

5、對照組WKY大鼠不同腦區(qū)差異表達情況。 方法：(1)開場實驗觀察幼年SHR/WKY大鼠自發(fā)活動情況；(2)應(yīng)用RT-PCR、Westem Blotting技術(shù)檢測SHR/WKY大鼠前額葉、海馬、伏核、紋狀體等腦區(qū)中Homer 1a、Homer 1b/c、Homer 2a/b mRNA和蛋白表達情況。 結(jié)果：(1)開場實驗顯示，SHR大鼠水平活動、直立次數(shù)均較對照WKY大鼠顯著增高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=8.34，p<0

6、.05；t=4.43，p<0.05)；(2)RT-PCR結(jié)果顯示，SHR大鼠前額葉中Homer 1a、Homer 2a/b mRNA表達豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.56，p<0.05；t=5.85，p<0.05)，而Homer 1b/c無著性差異。SHR大鼠海馬中Homer 1a、Homer 2a/b mRNA表達豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.95，p<0.05；t=2.66，p<0.0

7、5)，而Homer 1b/c無顯著性差異。SHR大鼠伏核中Homer 2a/b mRNA表達豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.66，p<0.05)，而Homerla、Homer 1b/c無著性差異。SHR大鼠紋狀體中Homer 1a、Homer 1b/c、Homer 2a/b mRNA表達豐度與、WKY大鼠均無顯著性差異；(3)WestemBlotting結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SHR大鼠前額葉eeHomer 1a、Homer 2

8、a/b蛋白表達豐度較WKYA鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.76，p<0.05：t=3.40，p<0.05)；SHR大鼠海馬中Homer 1a、Homer 2a/b蛋白表達豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.31，p<1.05：t=3.27，p<0.05)。 結(jié)論：(1)本實驗所用幼年SHR大鼠自發(fā)活動水平顯著高于對照WKY大鼠，符合作為ADHD動物模型的要求；(2)SHR大鼠前額葉、海馬腦gHomer