前列腺癌去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)化相關(guān)miRNA及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的整合分析.pdf

1、目的：前列腺癌發(fā)展至去勢(shì)抵抗?fàn)顟B(tài)后，便面臨治療上的難題。研究前列腺癌去勢(shì)抵抗發(fā)生的機(jī)制可有助于研究更有效的治療方式。miRNA在前列腺癌發(fā)生、發(fā)展及去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)變過程中發(fā)揮了重要作用。但其所處的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)有待更進(jìn)一步明確。有必要對(duì)前列腺癌去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)化相關(guān)miRNA及其所調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行整合分析。
　　方法：運(yùn)用已經(jīng)研發(fā)出的在預(yù)測(cè)miRNA活性方面有著較高的準(zhǔn)確性與效率的調(diào)控模塊—miRNA活性分析方法，篩選出在前列腺癌去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)

2、化過程中發(fā)揮活性作用的miRNA；采用熒光定量PCR方法，在激素敏感及去勢(shì)抵抗型前列腺癌細(xì)胞株中對(duì)感興趣的miRNA的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，驗(yàn)證其在不同狀態(tài)下的前列腺癌細(xì)胞株中存在差異表達(dá)；運(yùn)用系統(tǒng)生物學(xué)方法對(duì)熒光定量PCR所證實(shí)的miRNA的靶基因進(jìn)行GO富集分析、KEGG Pathway富集分析及GeneGo pathway富集分析，并構(gòu)建部分miRNA-mRNA所參與的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)，從而完成對(duì) miRNA在前列腺癌去勢(shì)抵抗過程中復(fù)雜的

3、網(wǎng)絡(luò)調(diào)控的初步分析。
　　結(jié)果：有三組基因表達(dá)數(shù)據(jù)集符合篩選標(biāo)準(zhǔn)。從中成功篩選出了有著差異表達(dá)的miRNA，有25個(gè)miRNA在兩組、兩組以上基因表達(dá)集里有差異表達(dá)；其中有11個(gè)miRNA在三組基因表達(dá)集里均有差異表達(dá)，且有2個(gè)已有文獻(xiàn)報(bào)道與前列腺癌去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)變相關(guān)。對(duì)另外9個(gè)和隨機(jī)選取的2個(gè)（共11個(gè)）miRNA，運(yùn)用熒光定量PCR方法檢測(cè)其在激素敏感型前列腺癌細(xì)胞株與去勢(shì)抵抗型前列腺癌細(xì)胞株中的相對(duì)表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)8個(gè)miRNA

4、在激素敏感型前列腺癌細(xì)胞株與去勢(shì)抵抗型前列腺癌細(xì)胞株中的存在差異表達(dá)。其中， miR-210、miR-218、miR-346、miR-197和 miR-149在去勢(shì)抵抗型前列腺癌細(xì)胞株中高表達(dá)。而miR-122、miR-145和let-7b卻表達(dá)降低。系統(tǒng)性分析結(jié)果顯示：包括AKT信號(hào)通路在內(nèi)的七條信號(hào)通路，已有報(bào)道證實(shí)與前列腺癌去勢(shì)抵抗轉(zhuǎn)化過程有關(guān)。對(duì)miR-218、miR-197、miR-145、miR-122及l(fā)et-7b所調(diào)控的

5、靶基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)這些miRNA參與PI3K、AKT3所處的AKT信號(hào)通路調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。而AKT信號(hào)通路參與去勢(shì)抵抗前列腺癌的生成。而miR-218、miR-197、miR-145、miR-149、miR-122及l(fā)et-7b則調(diào)控Ras和Rho蛋白及SCF復(fù)合體的功能，進(jìn)而通過影響前列腺癌細(xì)胞的G1/S期轉(zhuǎn)化或細(xì)胞周期變化，參與前列腺癌去勢(shì)抵抗的轉(zhuǎn)化過程。
　　結(jié)論：通過對(duì)miRNA及其所調(diào)控的分子信號(hào)通路數(shù)據(jù)整合分析，