FKBP51調控去勢抵抗性前列腺癌形成的分子信號及機制研究.pdf

1、目的：
　　檢測在人前列腺組織及裸鼠人前列腺癌異種種植瘤中FKBP51的表達情況，人工構建雄激素非依賴性前列腺癌細胞 LNCaP-AI,并動態(tài)檢測去勢抵抗過程中細胞內 FKBP51基因表達的變化及其在 CRPC發(fā)生所起的作用，初步探究FKBP51在CRPC發(fā)生過程中上下游信號通路的改變以及長鏈非編碼RNA在其中發(fā)揮的作用，探索前列腺癌由ADPC轉變?yōu)镃RPC的可能機制。
　　方法：
　　利用免疫組織化學技術檢測人前列腺

2、組織及裸鼠人前列腺癌異種種植瘤中FKBP51的表達；持續(xù)使用無雄激素培養(yǎng)基培養(yǎng)LNCaP細胞，人工構建雄激素非依賴性前列腺癌細胞LNCaP-AI；通過western blot動態(tài)檢測前列腺癌去勢抵抗過程中FKBP51基因表達的變化及其在CRPC發(fā)生所起的作用，以及其相關的NF-κB信號通路與AKT信號通路蛋白的變化；利用在線分析軟件catRAPID、LncRNA芯片、RNA免疫共沉淀實驗分析前列腺癌去勢抵抗過程中長鏈非編碼RNA的表達變

3、化情況及其參與FKBP51作用信號通路改變的可能機制。
　　結果：
　　1. FKBP51在人前列腺癌組織標本及裸鼠異種種植瘤標本中均有較高表達，且其表達在前列腺癌進展為去勢抵抗時明顯升高。
　　2. LNCaP前列腺癌細胞在無雄激素條件下培養(yǎng)1個月，細胞生長速度明顯放緩且大量死亡，培養(yǎng)3個月后細胞生長逐漸加快，成為雄激素非依賴的LNCaP-AI細胞亞系，并對抗雄藥物比卡魯胺及MDV3100產生耐藥。LNCaP-AI細

4、胞中FKBP51表達量明顯升高，且敲除FKBP51后細胞生長受到抑制。
　　3.在去雄培養(yǎng)LNCaP-AI細胞系過程中，AR-v7表達量逐漸增高，且可不依賴雄激素調控KFBP51的表達。在LNCaP-AI細胞中FKBP51主要與IKK結合參與NF-κB信號通路的調節(jié)，使caspase-3蛋白表達降低，BCL-2蛋白表達增高，從而抑制前列腺癌細胞的凋亡，而其對AKT信號通路無明顯作用。
　　4.在列腺癌去勢抵抗過程中，多種長鏈

5、非編碼RNA的表達發(fā)生明顯變化，其中PCAT-1表達量升高，進一步研究發(fā)現PCT-1可以通過與FKBP51結合，封閉FKBP51與PHLPP結合的位點，阻礙PHLPP對AKT的降磷酸化作用，從而影響FKBP51對下游的信號通路的調節(jié)。
　　結論：
　　本實驗通過構建雄激素非依賴性前列腺癌細胞模型 LNCaP-AI，證實FKBP51在去勢抵抗性前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，其通過與長鏈非編碼RNA PCAT-1共同作用，調