熱休克蛋白10在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的表達(dá)研究.pdf

1、熱休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是一組廣泛存在于原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中,于生理應(yīng)激或病理狀態(tài)下在細(xì)胞內(nèi)合成顯著增加,對(duì)生物體在嚴(yán)酷環(huán)境下的生存起重要作用,在進(jìn)化過(guò)程中高度保守的多肽類蛋白質(zhì)的統(tǒng)稱。HSPs的功能主要是作為分子伴侶輔助細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和折疊,近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其在腫瘤的生物學(xué)行為、腫瘤免疫、腫瘤耐藥性、細(xì)胞凋亡、腫瘤的治療和預(yù)后等多方面起作用。
　　HSP10是一種小分子 HSPs,存在于線粒體

2、和細(xì)胞漿中,其功能主要是輔助線粒體蛋白質(zhì)的折疊。以下兩個(gè)現(xiàn)象提示HSP10與腫瘤之間可能存在著密切的關(guān)系:
　　(1)早孕因子(Early pregnancy factor,EPF):EPF于上世紀(jì)70年代被發(fā)現(xiàn)存在于早孕婦女的血清中,是一種免疫抑制因子和生長(zhǎng)因子,為胚胎發(fā)育早期所必需。后來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)在惡性腫瘤(膀胱癌、黑色素瘤、絨癌和惡性葡萄胎)患者的血清中也能檢測(cè)到EPF,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)EPF與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。分子生物學(xué)證據(jù)

3、顯示 HSP10和EPF的氨基酸序列相似、分子量也相似,兩者可能是同一物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)、外的不同名稱。
　　(2)HSP60:它與HSP10都屬線粒體蛋白,兩者的基因定位在同一條染色體的相同位點(diǎn)上,在結(jié)構(gòu)和功能上緊密相關(guān)。已有大量文獻(xiàn)報(bào)道HSP60與肺癌、大腸癌、乳腺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤關(guān)系密切。所以, HSP10與腫瘤的之間應(yīng)該存在著密切的關(guān)系。
　　本研究應(yīng)用免疫組化 EnVision二步法和PCR技術(shù),從蛋白質(zhì)和基因兩

4、個(gè)水平檢測(cè)HSP10在大腸正常粘膜、腺瘤和腺癌中的表達(dá)。分析HSP10在正常粘膜→腺瘤→腺癌;在伴輕、中、重度不典型增生的大腸腺瘤;在高、中、低分化的大腸癌;在伴不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的大腸癌中的表達(dá)差異。目的在于研究HSP10在大腸癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律,并初步探討出現(xiàn)這種表達(dá)規(guī)律的機(jī)制。
　　免疫組化結(jié)果顯示:HSP10在大腸正常粘膜、腺瘤和腺癌中均有表達(dá),定位在正常粘膜上皮細(xì)胞的胞漿中,在腺瘤、腺癌細(xì)胞的胞漿中及胞膜上,在

5、胞膜上的表達(dá)較強(qiáng)烈,表現(xiàn)為帶狀濃集現(xiàn)象;HSP10在腺瘤、腺癌中的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常粘膜,其表達(dá)上調(diào)出現(xiàn)在大腸癌發(fā)生的早期,即從正常粘膜→輕度不典型增生腺瘤的過(guò)程中;在伴輕、中、重度不典型增生的大腸腺瘤,高、中、低分化狀態(tài)的大腸癌,有伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大腸癌中,HSP10的表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PCR檢測(cè)結(jié)果顯示HSP10 DNA在大腸腺瘤、腺癌中呈高水平表達(dá)。
　　本研究結(jié)果表明,HSP10及其DNA在大腸腺瘤、腺癌