PCDH20基因在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、Protocadherin-20(PCDH20)是protocadherin家族的成員,它的編碼基因定位于13q21染色體。有報(bào)道PCDH20在肺癌組織中表達(dá)下調(diào)或缺失與其啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平相關(guān),而且能夠抑制肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。然而它在大腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)的細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)目前尚不明確。
　　 目的:探討PCDH20的表達(dá)與其啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平的關(guān)系以及PCDH20基因在在大腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)的作用機(jī)制方法:用

2、半定量RT-PCR檢測(cè)PCDH20在正常成人組織和惡性腫瘤細(xì)胞株中的表達(dá);用甲基化特異性PCR(MSP)檢測(cè)正常結(jié)腸粘膜組織和大腸癌組織中PCDH20啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平。通過體外轉(zhuǎn)染,獲得穩(wěn)定表達(dá)PCDH2O的大腸癌細(xì)胞株,觀察PCDH2O對(duì)細(xì)胞表型的影響,包括細(xì)胞的增殖能力,集落形成能力,細(xì)胞遷移能力,細(xì)胞周期,細(xì)胞肌動(dòng)蛋白骨架和細(xì)胞凋亡等,并通過建立裸鼠皮下種植模型進(jìn)一步觀察PCDH20對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響。
　　 結(jié)果:PC