熱休克蛋白10、27和47在多囊卵巢綜合征發(fā)生發(fā)展中作用的研究.pdf

1、目的：通過研究熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)10、27和47在多囊卵巢綜合征患者卵巢組織中的表達(dá)；以及通過建立小鼠竇卵泡體外培養(yǎng)的模型，進(jìn)一步研究HSP10對卵泡發(fā)育的影響，探討熱休克蛋白10、27和47在多囊卵巢綜合征發(fā)生發(fā)展中的作用，為今后揭示多囊卵巢綜合征的發(fā)病機(jī)制和病理生理、發(fā)生發(fā)展的調(diào)控、預(yù)防和治療多囊卵巢綜合征等增加科學(xué)的依據(jù)。 方法：采用熒光實時定量PCR(SYBR GREEN Ⅰ as

2、say)、Western blot和免疫組織化學(xué)技術(shù)分別對3例正常婦女(對照組)、3例無排卵PCOS患者(PCOS組)卵巢組織的HSP10、HSP27和HSP47的mRNA及蛋白進(jìn)行測定。從20日齡小鼠卵巢中分離并挑選出220-250 μm的卵泡，置于96孔板中進(jìn)行3天的體外培養(yǎng)，通過形態(tài)學(xué)及培養(yǎng)液激素測定來判定培養(yǎng)的結(jié)果。采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，比較HSP10在培養(yǎng)前和培養(yǎng)后不同發(fā)育階段的卵泡中的表達(dá)。 結(jié)果：1.HSP10 m

3、RNA在PCOS患者卵巢組織的表達(dá)與對照組相比，差異無顯著性(p>0.05)，但個體差異性較大；HSP10蛋白在PCOS患者卵巢組織的表達(dá)與對照組相比，表達(dá)降低，差異有顯著性(p<0.05)；免疫組化結(jié)果顯示HSP10表達(dá)于對照組卵巢的所有細(xì)胞，而在PCOS組僅在卵泡膜細(xì)胞表達(dá)水平較高。2.HSP27 mRNA和蛋白在PCOS患者卵巢組織的表達(dá)與對照組相比，表達(dá)降低，差異有顯著性(p<0.05)；免疫組化結(jié)果顯示HSP27高表達(dá)于對照組

4、卵巢原始卵泡的卵母細(xì)胞。3.HSP47 mRNA和蛋白在PCOS患者卵巢組織的表達(dá)與對照組相比，高表達(dá)于PCOS組卵巢，差異有顯著性(p<0.05)；免疫組化結(jié)果顯示HSP47高表達(dá)于PCOS組卵巢的卵母細(xì)胞、顆粒細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞。 20日齡小鼠竇卵泡(220-250 μm)經(jīng)過3天的體外培養(yǎng)，體積增大，顆粒細(xì)胞增殖，竇腔擴(kuò)大，分泌的雌二醇增加(p<0.05)。HSP10在竇卵泡中僅表達(dá)于卵母細(xì)胞，在培養(yǎng)后的卵泡中則表達(dá)于卵母細(xì)胞，顆粒細(xì)