白血病中雌激素受體啟動子CpG島甲基化的實驗研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學博士學位論文白血病中雌激素受體啟動子CpG島甲基化的實驗研究姓名：姚婕申請學位級別：博士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：府偉靈20090501第三軍醫(yī)大學博十學位論文結(jié)果：1MSP檢測白血病細胞株HL一60、K562、Jurkat、Molt一4、U937和THP一1ER啟動子甲基化顯示：在六株白血病細胞株中，ERa—A，一B，C和ERp啟動子cpG島處于甲基化狀態(tài)，但只有ERaAmRNA表達失活。25一AzaCdR處理HL60

2、、K562、Jurkat、M01t4、U937和THP1后，ERa—A，一B，—C和ERp啟動子cpG島發(fā)生去甲基化，ERaAmRNA恢復表達。35AzacdR處理白血病細胞株后ERa蛋白表達較處理前ERa蛋白表達顯著增強pO01)，而5AzaCdR處理白血病細胞株后ERp蛋白表達較處理前ERp蛋白表達無明顯差異。45一AzaCdR處理白血病細胞株后細胞的活力，周期和增殖較處理前明顯下降pO01)。55一AzaCdR處理白血病細胞株后細

3、胞的凋亡較處理前明顯增加p001)。6利用MsP和RTPcR檢測40例白血病患者白細胞ERaA，一B，一c和ERD啟動子CpG島甲基化情況和mRNA表達情況，結(jié)果ERa—A甲基化陽性率為95％，而正常人白細胞ERa—A卻沒有發(fā)生甲基化。ERa—B，—C和ERD在白血病患者白細胞和正常人白細胞中均發(fā)生甲基化。40例白血病患者白血病細胞ERa_A，B，一C和ERpmRNA表達情況，結(jié)果只有ERa—A表達缺失(95％)，而ERa—B，—c和E

4、RD表達正常。7對40例白血病人的預后情況進行一年的追蹤后，發(fā)現(xiàn)兩例ERa—A未甲基化的女性病人對化療藥物敏感，預后良好。結(jié)論：1白血病細胞株雌激素受體兩個亞型的ERaA，一B，一C和ERp啟動子cpG島是處于高甲基化狀態(tài)，而只有ERa—AmRNA不表達。2用5一AzaCdR處理白血病細胞株后，ERa—A，一B，_C和ERp啟動子CpG島發(fā)生去甲基化，ERaAmRNA出現(xiàn)表達，說明ERaA啟動子甲基化導致ERaAmRNA表達失活。3通過