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1、目的:探討附子多糖是否能在體外誘導(dǎo)腫瘤患者外周血單核細(xì)胞向樹突狀細(xì)胞分化并成熟表達(dá)細(xì)胞表面分子,為進(jìn)一步研究附子多糖抗腫瘤作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
方法:取肝癌患者外周血體外分離單個(gè)核細(xì)胞,利用其黏附性去除淋巴細(xì)胞后加入含胎牛血清的RMPI-1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組加入低、中、高三種不同濃度的附子多糖,另設(shè)加入GM-CSF、IL-4和TNF-α的陽性對(duì)照組和不加任何誘導(dǎo)劑的陰性對(duì)照組,每隔2日更換半量培養(yǎng)液,共培養(yǎng)10日。其
2、間進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、倒置顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)、MTT法細(xì)胞活力檢測(cè)、掃描電鏡細(xì)胞成像、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表型(CD80、CD83、CD86)等檢測(cè)。
結(jié)果:中濃度附子多糖組能夠在一定時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)肝癌患者外周血單核細(xì)胞分化為樹突狀細(xì)胞,并促進(jìn)細(xì)胞增殖,高度表達(dá)CD80、CD83、CD86等共刺激分子和表面標(biāo)記物,與陽性對(duì)照組相比,兩組結(jié)果比較無明顯差異。與高、低濃度附子多糖組和陰性對(duì)照組結(jié)果相比有顯著差異。
結(jié)論:適當(dāng)濃
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