腫瘤微環(huán)境誘導(dǎo)不成熟樹突狀細(xì)胞為調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞的研究.pdf

1、Y膳鈾91R，蛇，洳涉文嗜’碩士學(xué)位論文⑧I略3520518027二論文鰒目勝瘴熊玨擅透顯丕照塾翅塞然墊照發(fā)迥苴絲越一塞煙照鯉盈塞，作看姓名鞋塞鰹指導(dǎo)教師苴譬注擔(dān)援學(xué)科c專業(yè))魚痤堂所在學(xué)院匡筆睦i’提交月期2鯉z生且浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文胞表面Ia、CD40、CD80、CD86的水平都比較低，具有較強(qiáng)的吞噬功能，可以認(rèn)為是一種不成熟DC。我們用新鮮分離的原代腫瘤細(xì)胞與不成熟DC體外共培養(yǎng)，用來(lái)模擬腫瘤微環(huán)境與DC的相互作用，開展以下實(shí)驗(yàn)

2、研究。對(duì)于腫瘤周圍浸潤(rùn)的DC的狀態(tài)目前還存在著爭(zhēng)議，但大量數(shù)據(jù)表明，腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌一些免疫抑制性細(xì)胞因子阻礙其周圍浸潤(rùn)的DC成熟使之處于不成熟狀態(tài)；為了闡明腫瘤周圍浸潤(rùn)DC的狀態(tài)，我們利用仃miswell系統(tǒng)用腫瘤培養(yǎng)上清對(duì)體外培養(yǎng)的不成熟DC和成熟DC分別進(jìn)行趨化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腫瘤培養(yǎng)上清能夠趨化大量不成熟DC，幾乎不趨化成熟DC。因此，我們將體外培養(yǎng)5天的不成熟DC與新鮮分離制各的腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)60h，之后用CDllc磁珠分離DC，檢

3、測(cè)了誘導(dǎo)后(與腫瘤共培養(yǎng)盾)的DC的表型及其在LPS刺激后的表型變化，并將之與誘導(dǎo)前的不成熟DC、不成熟DC加LPS刺激后活化成熟的DC進(jìn)行了比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與成熟DC相比，腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)后的DC表面分子CD86、Ia、CDllc下調(diào)，CDllb上調(diào)，而CD40、CDS0的變化不大，并且在LPS刺激后表面MHCII類分子和共刺激分子并沒(méi)有顯著升高，表現(xiàn)為CDllc。oWIahCDllbh訕的穩(wěn)定的表型特征。吞噬功能在一定程度上代表了DC的

4、成熟度和功能狀態(tài)，一般認(rèn)為DC越成熟吞噬能力越弱，而抗原遞呈能力越強(qiáng)。我們進(jìn)一步分析了腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)形成的cDllcl”Ia。owcDllb“蜘Dc的吞噬功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該群CDllct”Ial。WCDllbhi曲DC與不成熟DC相似，具有很強(qiáng)的吞噬能力，甚至強(qiáng)于不成熟DC的吞噬能力，即使在LPS刺激后，其仍然顯示很高的吞噬能力，但不成熟DC在LPS刺激后變成了成熟DC，其吞噬能力顯著下降。提示腫瘤細(xì)魂體外誘導(dǎo)形成的CDllchIa如CDl

5、lb慟DC不同于不成熟DC和成熟DC，并處于功能穩(wěn)定狀態(tài)。從細(xì)胞因子分泌譜看，CDlldhIalD”∞11bh培hDC自發(fā)分泌高量的IL10、NO、PGE2，而IL12的分泌量很低，LPS刺激后變化不大，進(jìn)一步提示該cDllc腳IalowcDllb“袖Dc處于穩(wěn)定的狀態(tài)并且可能具有下調(diào)免疫應(yīng)答的能力。DC的重要功能是抗原遞里能力，為了探討cDllcI”Ialo℃D11b螄曲Dc的抗原遞呈能力，我們將CDllcl”IahcDllb蛐Dc與