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文檔簡介
1、小麥是重要的糧食作物,其產(chǎn)量、品質(zhì)和抗性一直是育種家們關注的重點。植物激素在調(diào)控植物的生長、發(fā)育、繁殖以及調(diào)控植物應對生物和非生物脅迫等方面起著關鍵的作用。不同植物激素相互作用構成一個復雜的信號網(wǎng)絡。本研究對小麥植物激素相關基因進行表達分析,初步解析了小麥植物激素信號的互作,主要結果如下:
利用水楊酸(salicylic acid,SA)、茉莉酸甲酯(methylj asmonic acid,MeJA; JA的衍生物)、禾谷鐮
2、刀菌和白粉菌處理的小麥的穗子和葉片,提取RNA反轉(zhuǎn)錄,用于反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)和定量PCR(Q-PCR)分析。采用BLAST檢索工具搜集到56個小麥和大麥的PR1基因,并通過聚類分析劃分為7個類群。依據(jù)聚類分析結果設計了91對具有類群特異性和基因特異性的PCR引物。共有27對引物適合RT-PCR,其中有9對引物可用于對小麥葉子的Q-PCR檢測,10對可用于穗子的Q-PCR檢測。在葉子中,MeJA處理可使11對RT-PCR引物擴增
3、條帶比SA處理和空白對照的更亮;在這11對引物中,10mM SA處理使7對引物的擴增條帶比其它濃度SA的更亮;Q-PCR結果顯示MeJA顯著性誘導葉子上類群1的PR1基因表達,SA和MeJA負調(diào)控類群2的PR1基因表達。當檢測SA和MeJA對小麥穗子上PR1基因表達的影響時,發(fā)現(xiàn)在這27對引物中,除了1mM SA和MeJA能略微誘導類群2的PR1之外,其它濃度的處理對PR1基因表達沒有顯著的影響。穗子樣品RT-PCR和Q-PCR結果相似
4、。實驗檢測結果顯示葉片和穗傾向于表達不同類群的PR1基因,并且PR1基因以不同的方式響應SA和MeJA。
在27對RT-PCR引物中,有20對引物在感染白粉病的葉片樣品中檢測出預期RT-PCR條帶,其中11對引物目標條帶亮度增加;在有效的9對Q-PCR引物中有5對Q-PCR引物表達顯著增強(水對照的7.4-33.8倍),主要是類群1和類群5的PR1基因,其余4對無明顯差異。在27對RT-PCR引物中,有19對引物在感染赤霉病穗
5、子樣品中檢測出預期RT-PCR條帶,其中12對表達量升高;10對Q-PCR中,有9對在赤霉病樣品中上調(diào)表達(水對照的24.2-143.4倍),1對表達無明顯差異,涵蓋了類群1、類群2和類群5在內(nèi)的PR1基因。
向小麥穗子施加外源植物激素,提取穗子RNA,進行表達譜分析,初步篩選出74個激素信號轉(zhuǎn)導相關基因。包括與生長素相關基因12個,與赤霉素相關基因9個,與脫落酸相關基因15個,與乙烯相關基因15個,與細胞分裂素相關基因8個,
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