小麥抗病相關(guān)基因的轉(zhuǎn)化及瞬間表達(dá)研究.pdf

1、　　小麥?zhǔn)俏覈酥潦澜绲闹匾Z食作物。小麥真菌病害是影響小麥產(chǎn)量的重要因素。隨著植物分子生物學(xué)和功能基因組學(xué)的快速發(fā)展，我們對植物復(fù)雜的抗病反應(yīng)過程有了越來越清晰的了解。同時，越來越多的抗病和抗病反應(yīng)過程相關(guān)基因的克隆也成為可能。對這些基因進(jìn)行功能鑒定和抗病效果分析，并利用基因工程手段開展小麥抗病分子育種將具有廣闊的前景。結(jié)合傳統(tǒng)的育種方法，對小麥抗病性狀的改良將更為快速和高效。 本實驗首先利用基因槍轉(zhuǎn)化方法，將兩個抗病相關(guān)基因

2、TaTBL和TaTST轉(zhuǎn)入到感病小麥品種楊麥158中，獲得經(jīng)過分子鑒定和抗性分析的轉(zhuǎn)化植株。隨后，又利用瞬間表達(dá)技術(shù)對TaTBL、TaPK1、TaTST、G1b3s2、Cht4和G1b3s6等6個抗病相關(guān)基因的功能進(jìn)行了分析，表明其在感病小麥葉片表皮細(xì)胞中的過量表達(dá)能顯著抑制白粉菌對細(xì)胞的侵入和吸器的形成，提高表達(dá)細(xì)胞的抗性。 1.1小麥抗病相關(guān)基因的轉(zhuǎn)化　　利用花青素合成酶調(diào)節(jié)基因作為報告基因?qū)τ绊懟驑屴D(zhuǎn)化的多個參數(shù)進(jìn)行了

3、深入的分析，優(yōu)化了轉(zhuǎn)化過程。轉(zhuǎn)化植株苗期離體葉片的白粉病接種實驗表明，TaTBL和TaTST基因的導(dǎo)入，在一定程度上增強了轉(zhuǎn)化植株對白粉菌的抗性，表現(xiàn)為延緩了白粉菌的發(fā)育。 1.2小麥抗病相關(guān)基因的瞬間表達(dá)研究　　采用瞬間表達(dá)技術(shù)分析了小麥類Beclin1基因TaTBL、絲氨酸/蘇氨酸激酶基因TaPK1、硫代硫酸硫轉(zhuǎn)移酶基因TaTST、β-1,3-葡聚糖苷酶基因G1b3s2、幾丁質(zhì)酶基因Cht4和β-1，3-葡聚糖苷酶基因G1