油菜角果開裂相關(guān)基因的預(yù)測及其功能的初步鑒定.pdf

1、油菜角果開裂給油菜的生產(chǎn)帶來了許多不利的影響，徹底弄清角果開裂過程及其潛在的遺傳調(diào)節(jié)機制能為油菜抗裂角品種的培育及挑選提供新的途徑。前期對模式植物擬南芥的研究，鑒定出幾個轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子通過調(diào)節(jié)裂區(qū)不同細(xì)胞形態(tài)的分化形成參與了擬南芥角果的開裂過程。這幾個轉(zhuǎn)錄因子分別是：FRUITFULL(FUL)、SHATTERPROOF1(SHP1)、SHATFERPROOF2(SHP2)、INDEHISCENT(IND)、ALCATRAZ(ALC)。<

2、br>　　 為了尋找油菜中以上幾個基因的同源基因，本文運用BLAST手段在油菜cDNA庫中搜尋到與這幾個基因相似性比較高的一些EST序列和cDNA序列。通過拼接、克隆以及RACE方法，獲得了幾條與FUL、SHP1、SHP2、IND和ALC基因序列同源性比較高的cDNA序列，一個為已知基因BnSHP1，其它的暫命名為甘藍型油菜的候選基因BnFUL-a、BnFUL-b、BnFUL-c、BnFUL-d、BnSHP2、BnIND和BnALC。

3、
　　 RT-PCR結(jié)果顯示，BnFUL-b、BnALC、BnSHP2和BnSHP1基因在花和角果中都有顯著的表達，此外，BnFUL-b、BnALC、BnSHP2還在其它部位有表達。Southern雜交技術(shù)鑒定了BnSHP2基因在甘藍型油菜基因組中至少存在兩個拷貝。
　　 為了鑒定這幾個預(yù)測基因的功能，本文構(gòu)建了BnFUL-b基因的過量表達載體和BnALC基因的抑制表達載體，然后通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化甘藍型油菜，通過PCR鑒