版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、腸桿菌科細(xì)菌對喹諾酮類藥物耐藥性日益加重,以往喹諾酮類的耐藥研究多集中在染色體介導(dǎo)的靶位改變、膜通透性降低、外排泵亢進(jìn)機制,質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥罕見報道。qnrA是首次報道的質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮耐藥基因,由MartilqeZ-MartiFlez等在1株肺炎克雷伯菌中檢出,作用機制是其編碼的蛋白能保護(hù)喹諾酮類作用的靶位導(dǎo)致耐藥。喹諾酮類是人工合成的藥物,一直認(rèn)為不受修飾酶影響,最近Robicsek等首次報道了喹諾酮類修飾酶基因aac(6’)
2、-Ib-cr,其也位于質(zhì)粒上,它本質(zhì)上是一種普通氨基糖甙類乙酰轉(zhuǎn)移酶基因aac(6’)-Ib的變異體,第223和454位兩處堿基的突變賦予了其修飾喹諾酮類的特性,但只能修飾含游離氨基的喹諾酮類且僅介導(dǎo)低水平耐藥,研究發(fā)現(xiàn)該變異體仍能修飾普通型aac(6’)-Ib的底物但作用輕度降低,故其能修飾氨基糖甙類和喹諾酮類兩種完全不同類的抗生素而致耐藥。本研究以2001-2002年從我市八家醫(yī)院分離的腸桿菌科臨床株著手,研究細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類
3、耐藥機制,為臨床合理應(yīng)用抗生素、控制耐藥基因的播散提供理論依據(jù)。 第一部分:耐環(huán)丙沙星腸桿菌科臨床株中qnrA基因的檢測 目的: 調(diào)查2001-2002年天津地區(qū)八家醫(yī)院收集的116株環(huán)丙沙星耐藥(CPLX MIC≥4ug/ml)的腸桿菌科菌株中qnrA基因的存在狀況。 方法: 1、自2001年3月-2002年12月從天津市八家醫(yī)院收集116株環(huán)丙沙星耐藥(CPLX MIC≥4ug/ml)的腸桿菌
4、科臨床株,包括大腸埃希菌77株,克雷伯菌屬15株,陰溝腸桿菌24株。 2、采用瓊脂稀釋法測腸桿菌科臨床株對環(huán)丙沙星的MIC,按臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)委員會CLS12006年的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀,質(zhì)控菌株為大腸埃希氏菌ATCC25922。 3、應(yīng)用PCR方法調(diào)查qnrA基因在腸桿菌科臨床株中的分布,陰性質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922, qnrA陽性質(zhì)控菌為肺炎克雷伯菌,由安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科李濤碩士提供。 結(jié)果
5、: 116株環(huán)丙沙星耐藥的腸桿菌科臨床株中79(68.1%)株對環(huán)丙沙星高度耐藥(CPLX MIC≥32ug/ml);116株環(huán)丙沙星耐藥的腸桿菌科臨床株中未發(fā)現(xiàn)qnrA基因陽性株。 結(jié)論:qnrA基因在天津地區(qū)腸桿菌科臨床株中甚為罕見,qnr樣基因的流行狀況有待更加細(xì)致而全面的研究。 第二部分:aac(6’)-Ib-cr基因介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機制的研究 目的: 調(diào)查77株環(huán)丙沙星耐藥的大腸埃希菌
6、(同第一部分)中aac(6’)-Ib基因的存在狀況并初步探討其變異體aac(6’)-Ib-cr介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機制。 方法: 1、應(yīng)用PCR方法篩查菌株的aac(6’)-Ib基因。 2、瓊脂稀釋法測aac(6’)-Ib陽性菌株對卡那霉素的MIC,按臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)委員會CLS12006年的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀,質(zhì)控菌株為大腸埃希氏菌ATCC25922。 3、DNA測序檢測aac(6’)-Ib-cr基因變異體,從a
7、ac(6’)-Ib陽性株中選擇對卡那霉素耐藥表型不同的部分菌株,其PCR擴增產(chǎn)物送上海生工進(jìn)行DNA序列分析。 4、接合傳遞試驗方法探討細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性傳遞,大腸埃希菌NK5449作為接合傳遞受體菌株,供體菌株為臨床分離株。在含卡那霉素4ug/ml和利福平600ug/ml的LB選擇培養(yǎng)基上篩選接合株,有菌落生長為接合成功;為進(jìn)一步了解有無喹諾酮類和氨基糖甙類的耐藥轉(zhuǎn)移,分別測供體株、受體株、接合株對喹諾酮類和氨基糖甙類的MI
8、C。 結(jié)果: 1、aac(6’)-Ib的PCR擴增,77株對環(huán)丙沙星耐藥的大腸埃希菌中15株檢出aac(6’)-Ib,其中對卡那霉素耐藥10株、中介4株、敏感1株。 2、序列分析,從15株aac(6’)-Ib陽性株中選出對卡那霉素耐藥表型不同的6株菌即E13、E14、E40、E60、E74、E75,其中E75為敏感株,E40、E60為耐藥株,其余3株為中介株;6株菌的PCR擴增產(chǎn)物進(jìn)行DNA序列分析,結(jié)果表明:E
9、60攜帶普通型aac(6’)-Ib,其余5株菌在aac(6’)-Ib的第223位和454位均出現(xiàn)點突變即攜帶aac(6’)-Ib-cr。 3、接合傳遞試驗,對6株測序的菌株進(jìn)行接合傳遞,其中E13、E14、E40、E60在選擇培養(yǎng)基上有菌生長接合成功;藥敏結(jié)果表明:攜帶普通型aac(6’)-Ib的菌株E60其接合株與受體株相比,對3種喹諾酮類藥物的MIC無差別,而攜帶aac(6’)-Ib-cr的菌株E13、E14、E40其接合株
10、與受體株相比,對環(huán)丙沙星和諾氟沙星(二者含游離氨基)的MIC提高了2個稀釋度,對左氧氟沙星的MIC無變化,兩種來源的接合株的共同之處在于對卡那霉素和慶大霉素的MIC均比受體株明顯提高。 結(jié)論: 1、天津地區(qū)大腸埃希菌臨床株中首次發(fā)現(xiàn)了aac(6’)-Ib-cr基因。 2、aac(6’)-Ib-cr對菌株的喹諾酮類和氨基糖甙類抗生素的耐藥起到一定的作用,由于耐藥基因位于質(zhì)粒上增加了耐藥性水平播散的危險。 3
11、、本研究的創(chuàng)新點: 第一同時對質(zhì)粒介導(dǎo)的兩種喹諾酮耐藥機制進(jìn)行了研究,本研究對天津地區(qū)116株腸桿菌科臨床株篩查qnrA未發(fā)現(xiàn)陽性株,但其實際流行狀況尚待深入調(diào)查;首次在天津地區(qū)發(fā)現(xiàn)了aac(6’)-Ib-cr,國外學(xué)者Robicsek首次報道了aac(6’)-Ib-cr并進(jìn)一步對中國上海大腸埃希菌中該基因的流行狀況進(jìn)行調(diào)查,除上海外國內(nèi)尚無其他地方出現(xiàn)aac(6’)-Ib-cr的報道。 第二根據(jù)試驗結(jié)果提出一個假設(shè):慶
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 30340.腸桿菌科細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮耐藥機制研究
- 腸桿菌科細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)耐喹諾酮類藥物機制研究.pdf
- 腸桿菌科細(xì)菌qnrB介導(dǎo)的喹諾酮類藥物耐藥機制的研究.pdf
- 質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類qnr基因在腸桿菌科中的流行及耐藥特性研究.pdf
- 產(chǎn)氣腸桿菌耐藥特性及其質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因研究.pdf
- 大腸埃希菌臨床株質(zhì)粒倡導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機制的研究.pdf
- 腸球菌臨床株對氟喹諾酮類抗菌藥物耐藥機制的研究.pdf
- 質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮耐藥機制研究.pdf
- 大腸桿菌中國分離株質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類藥物耐藥性的流行特征.pdf
- 陰溝腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)耐藥機制的研究.pdf
- qnr介導(dǎo)細(xì)菌對喹諾酮類耐藥機制的研究.pdf
- 質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌對喹諾酮抗生素耐藥機制的研究.pdf
- 臨床分離的肺炎克雷伯菌耐藥性檢測及對質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類藥物耐藥機制的研究.pdf
- 產(chǎn)ESBLs腸桿菌科細(xì)菌對喹諾酮類藥物的耐藥性分析.pdf
- 禽源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)氟喹諾酮類耐藥基因的檢測及中藥消除耐藥性研究.pdf
- 變形桿菌整合子分型及質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮耐藥機制研究.pdf
- 7年間大腸埃希菌臨床連續(xù)分離株耐藥性變遷及質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因研究.pdf
- 結(jié)核分枝桿菌喹諾酮類耐藥基因的研究.pdf
- 大腸埃希菌等質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因檢測及耐藥性研究.pdf
- 水產(chǎn)動物源氣單胞菌耐藥性與質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥研究.pdf
評論
0/150
提交評論