濱蒿內(nèi)酯通過CAR對CYP450代謝酶和MDRI影響的體外研究.pdf

1、背景：濱蒿內(nèi)酯(scoparone SCO)分子式為C<,11>H<,10>O<,4>，是傳統(tǒng)中藥茵陳或茵陳蒿中的有效單體，而茵陳又是茵陳蒿湯劑、茵梔黃方劑等傳統(tǒng)中藥劑方的主要成分。濱蒿內(nèi)酯具有清熱利濕，保肝退黃的功效及抗血栓、免疫抑制、消炎和舒張氣管的作用；現(xiàn)代的臨床主要用于黃疸、肝炎、肝硬化、肝癌、哮喘及血栓等疾病的治療。研究發(fā)現(xiàn)，茵梔黃方劑降黃的機(jī)制主要為通過核受體CAR誘導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)膽汁酸的主要轉(zhuǎn)運(yùn)體如MRP2/UGT/GST，而對P

2、XR的作用則很小，同時，篩選茵梔黃里CAR激活劑并鑒定出一個活性成分就是濱蒿內(nèi)酯。另外，很多文獻(xiàn)報道CAR和PXR能誘導(dǎo)調(diào)控CYP2C9，CYP2C19，CYP3A4和MDRl的轉(zhuǎn)錄水平，其中CYP2C9，CYP2C19和CYP3A4參與了臨床上絕大多數(shù)藥物的代謝。多藥耐藥基因MDR1編碼了P-糖蛋白，廣泛分布于體內(nèi)正常組織，如肝、腎、小腸和腦等，對于藥物吸收、組織分布及消除均起著重要的作用，其抑制劑對抗腫瘤藥物多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)具有重要意

3、義。既然濱蒿內(nèi)酯能激動CAR，而CAR又能調(diào)控CYP2C9，CYP2C19，CYP3A4和MDRl的轉(zhuǎn)錄，那么濱蒿內(nèi)酯能不能通過激動CAR而誘導(dǎo)它們的轉(zhuǎn)錄水平呢? 目的：本課題旨在查明濱蒿內(nèi)酯是否能夠誘導(dǎo)CYP2C9，CYP2C19，CYP3A4和MDR1，如果有誘導(dǎo)的話是否通過CAR起作用。 方法：通過建立體外的細(xì)胞篩選平臺，在mRNA水平和雙熒光報告基因?qū)用嫣接憺I蒿內(nèi)酯對幾種重要的CYP450酶和藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)錄水平的

4、影響，是否通過CAR起作用； 結(jié)果：濱蒿內(nèi)酯(20μM)在mRNA水平顯著誘導(dǎo)CYP2C9，CYP2C19，CYP3A4和MDR1；通過雙熒光報告基因檢測，發(fā)現(xiàn)濱蒿內(nèi)酯(20μM)顯著增加CYP2C9，CYP2C19，CYP3A4和MDR1的啟動子活性是通過核受體CAR來實現(xiàn)的。 結(jié)論：本項目從分子、細(xì)胞水平發(fā)現(xiàn)濱蒿內(nèi)酯能通過CAR激動CYP2C9．CYP2C19，CYP3A4和MDR1的轉(zhuǎn)錄水平。證明濱蒿內(nèi)酯是新藥開發(fā)