全雄黃顙魚蛋白質營養(yǎng)生理及y+LAT1基因表達調控的部分機制研究.pdf

1、本研究以全雄黃顙魚為試驗動物，通過生長試驗、消化試驗、比較屠宰試驗，結合生長性能、消化率、酶學、基因表達量等指標的測定，旨在探討全雄黃顙魚對飼料蛋白質、氨基酸的消化吸收機制與利用規(guī)律，掌握全雄黃顙魚蛋白質、賴氨酸的適宜需求量，為完善全雄黃顙魚的營養(yǎng)生理與營養(yǎng)需求參數(shù)提供依據(jù)。主要研究內容如下:
　　1.設計3種蛋白質水平分別為40％、37％、34％的試驗飼料，飼喂平均體重為（10.11±0.12）g的黃顙魚，研究飼料不同蛋白質水平

2、對全雄黃顙魚表觀消化率及消化酶活性的影響。結果表明:1）飼料不同蛋白質水平對全雄黃顙魚能量、蛋白質、脂肪和氨基酸的表觀消化率影響顯著(P＜0.05)，且隨飼料蛋白質水平的降低，其呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢;2）飼料不同蛋白質水平對全雄黃顙魚腸淀粉酶和胃蛋白酶活性均無顯著影響(P＞0.05)，對其他組織消化酶的活性影響極顯著(P＜0.01);肝淀粉酶、胃淀粉酶和不同組織的脂肪酶及胃蛋白酶的活性均是37％組最高;而胰蛋白酶活性均隨著飼料蛋白質水平

3、的降低而下降。結論:在一定范圍內，適當降低飼料蛋白質水平，可顯著提高全雄黃顙魚對營養(yǎng)物質的消化率。
　　2.設計5組蛋白質水平分別為43％、42％、40％、39％、36％的試驗飼料，飼喂平均體重2 g左右的全雄黃顙魚60 d，探討飼料不同蛋白質水平對其生長、體組成及血清生化指標的影響。結果表明:1）42％組增重率、特定生長率、蛋白質效率極顯著高于其它四組（P＜0.01），餌料系數(shù)極顯著低于其它四組(P＜0.01)，以蛋白質效率為參

4、考指標，全雄黃顙魚最適宜飼料蛋白質水平為41.77％;2）粗蛋白、粗脂肪、粗灰分及氨基酸沉積率均隨著飼料蛋白質水平的降低而升高，且組間差異極顯著(P＜0.01);3）飼料不同蛋白質水平極顯著影響全雄黃顙魚血清ALT和AST（P＜0.01），但對TP、ALB、GLOB、GLU、BUN、CHO1和TG無顯著影響(P＞0.05);4)隨著飼料蛋白質水平的降低，全雄黃顙魚全魚、肌肉及去內臟樣粗蛋白含量變化不大(P＞0.05)，但全魚、去內臟樣粗

5、脂肪含量呈逐漸升高的趨勢(P＜0.01)，肌肉粗脂肪含量呈逐漸降低的趨勢（P＜0.01）;粗灰分含量與粗脂肪含量變化情況相反(P＜0.01);隨著飼料蛋白質水平的降低，全雄黃顙魚幼魚全魚氨基酸含量變化不大（P＞0.05），但肌肉(P＜0.05)、去內臟樣(P＜0.01)總氨基酸含量、必需氨基酸總量均呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢。結論:全雄黃顙魚幼魚適宜飼料蛋白質水平為41.77％。
　　3.設計4組試驗飼料，其中對照組飼料蛋白質水平為38

6、％，Lys組、Thr組、Met組是在對照組飼料的基礎上分別添加1.4％微囊賴氨酸、0.7％微囊蘇氨酸和0.37％微囊蛋氨酸，飼喂平均體重（9.29±0.11）g的黃顙魚，研究飼料中添加不同人工合成氨基酸對全雄黃顙魚生長性能及消化率的影響。結果顯示:1）Lys組增重率和蛋白質效率均顯著高于其它三組(P＜0.05)，且餌料系數(shù)顯著低于其它各組(P＜0.05)，Lys組特定生長率與Met組之間差異不顯著(P＞0.05)，但顯著高于對照組和Th

7、r組(P＜0.05)，成活率各組間差異不顯著（P＞0.05）;2）Thr組和Met組干物質消化率、粗蛋白質消化率之間無顯著差異（P＞0.05），但均顯著高于對照組和Lys組(P＜0.05)，Met組脂肪消化率顯著高于其它三組(P＜0.05)，能量消化率Thr組顯著高于其它三組(P＜0.05);Thr組氨基酸消化率最高，對照組氨基酸消化率最低，除谷氨酸消化率各組間差異不顯著外(P＞0.05)，其余氨基酸消化率均達到極顯著水平(P＜0.01

8、)。結論:在蛋白質水平為38％的配合飼料中添加1.4％微囊賴氨酸對全雄黃顙魚幼魚具有明顯的促生長效果。
　　4.設計9組試驗飼料，其中對照組蛋白質水平為34％，其余各組是在對照組飼料的基礎上分別添加0.5％、1.5％、2.5％晶體賴氨酸和1％、2％、3％、4％、5％微囊賴氨酸，飼喂平均體重5.5 g左右的黃顙魚63 d，旨在探討全雄黃顙魚對晶體或微囊氨基酸的利用效果及對賴氨酸的適宜需求。結果表明:1）隨著飼料賴氨酸水平升高，全雄黃

9、顙魚增重率、特定生長率、蛋白質效率呈現(xiàn)出先上升后降低的趨勢(P＜0.01)，以蛋白質效率為參考指標，可得全雄黃顙魚適宜飼料賴氨酸水平為2.61％;蛋白質沉積率、脂肪沉積率、灰分沉積率及氨基酸沉積率在晶體賴氨酸添加組呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(P＜0.05)，而微囊賴氨酸添加組則呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(P＜0.05);2)飼料中添加晶體或微囊賴氨酸對魚體粗蛋白質含量影響不大，但粗脂肪含量隨飼料中賴氨酸水平的升高而增加(P＜0.05)，而粗灰分

10、含量隨飼料中賴氨酸水平的升高而減少(P＜0.05);3)隨著飼料賴氨酸水平的升高，全魚氨基酸含量無明顯變化(P＞0.05)，肌肉氨基酸含量呈現(xiàn)出降低的趨勢(P＜0.05)，去內臟樣氨基酸含量呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(P＜0.05)。結論:在本試驗條件下，全雄黃顙魚幼魚適宜飼料賴氨酸水平為2.61％，且在低蛋白飼料中(34％)添加晶體或微囊賴氨酸能促進全雄黃顙魚幼魚的生長。
　　5.利用逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)，并利用實

11、時熒光定量PCR探討y+LAT1在黃顙魚各組織中的表達情況以及添加不同形式氨基酸對其mRNA的影響。結果表明:1）在全雄黃顙魚的9個組織中均檢測到y(tǒng)+LAT1基因的表達，其相對表達量高低順序為幽門＞肝臟＞腦、心、胃、前腸、中腸＞腎＞后腸，組間差異顯著(P＜0.05);2)飼料中添加微囊Lys，前腸和胃y+LAT1 mRNA表達水平均呈上升趨勢(P＜0.05)。結論:在飼料中添加微囊Lys可以上調前腸和胃y+LAT1 mRNA的表達水平。