2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩53頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、Six1是SIX轉(zhuǎn)錄因子家族(Sine oculis homeobox family,SIX)中重要的成員,在肌肉發(fā)生、生肌節(jié)形成及肌纖維類型分化等過程中起著重要作用。另外,Six1與其協(xié)同因子Eya2能直接上調(diào)mTOR的表達(dá),誘導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成代謝增強(qiáng),引起心肌生理性肥大,表明Six1在肌肉蛋白質(zhì)合成代謝過程中也發(fā)揮著重要的作用。但目前關(guān)于Six1與肌肉蛋白質(zhì)代謝的具體調(diào)控機(jī)制還未見報(bào)道。本研究通過鴨成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染真核表達(dá)載體pEGFP-

2、duSix1,分析過表達(dá)Six1基因?qū)?xì)胞增殖活性及細(xì)胞蛋白質(zhì)代謝的影響。同時(shí)為深入探討Six1是否對(duì)蛋白質(zhì)合成的相關(guān)基因PI3K、mTOR具有調(diào)控作用,采用其特異性抑制劑LY294002、雷帕霉素處理鴨成肌細(xì)胞,再過表達(dá)Six1基因,探討Six1基因在細(xì)胞蛋白代謝過程中可能存在的具體調(diào)控途徑。結(jié)果表明:
  1、利用真核表達(dá)載體pEGFP-duSix1轉(zhuǎn)染鴨成肌細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)Six1基因的mRNA表達(dá)量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01

3、),細(xì)胞增殖活性明顯上升(P<0.05),同時(shí)mTOR、S6K1的mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(P<0.05)。Western-blot結(jié)果也表明過表達(dá)Six1能上調(diào)S6K1的蛋白表達(dá)量,表明過表達(dá)Six1基因?qū)?xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)合成代謝具有明顯的促進(jìn)作用,同時(shí)Six1對(duì)于PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路存在重要調(diào)控作用。
  2、pEGFP-duSix1轉(zhuǎn)染鴨成肌細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染組FOXO1、MAFbx、MuRF1的mRNA表達(dá)量相對(duì)對(duì)

4、照組也有不明顯的上升趨勢(shì)(P>0.05),Western-blot結(jié)果也顯示p-FOXO1的蛋白表達(dá)量上升,推測(cè)過表達(dá)Six1基因也可能影響細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的降解代謝途徑,但需要進(jìn)一步的研究證實(shí)。
  3、利用PI3K、mTOR特異性抑制劑LY294002、Rapamycin處理鴨成肌細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖活性均明顯降低(P<0.05),并且隨著處理時(shí)間延長和抑制劑濃度增加,抑制效果越明顯;其中,LY294002抑制劑處理細(xì)胞后,通過熒光

5、定量PCR檢測(cè)蛋白合成代謝信號(hào)通路相關(guān)基因的mRNA表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)PI3K、Akt、mTOR表達(dá)量顯著下降(P<0.05);而在Rapamycin處理實(shí)驗(yàn)組中,發(fā)現(xiàn)僅mTOR的表達(dá)量明顯下調(diào)(P<0.05),PI3K、Akt的表達(dá)量并沒有明顯下調(diào)。Western-blot結(jié)果顯示S6K1的蛋白表達(dá)量下降,表明兩種抑制劑對(duì)于細(xì)胞蛋白質(zhì)合成均具有明顯的抑制作用;同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)與蛋白降解的相關(guān)基因FOXO1、MAFbx、MuRF1的mRNA表達(dá)量

6、卻沒有明顯的變化。
  4、過表達(dá)Six1基因可明顯緩解LY294002及Rapamycin處理所引起的細(xì)胞蛋白合成代謝的抑制作用,能明顯上調(diào)鴨成肌細(xì)胞的增殖活性(P<0.05),同時(shí)mTOR、S6K1的mRNA表達(dá)量也都顯著上調(diào)(P<0.05),另外,S6K1的蛋白表達(dá)量也呈現(xiàn)上調(diào)趨勢(shì)。但是在兩種抑制劑處理后過表達(dá)Six1導(dǎo)致蛋白降解相關(guān)基因FOXO1、MAFbx、MuRF1的mRNA表達(dá)量表現(xiàn)出不同的變化趨勢(shì)。
  5、

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論