胃癌病人體內(nèi)腫瘤—機體免疫系統(tǒng)相互作用的實驗研究——腫瘤局部細胞因子表達及T細胞受體池分析.pdf

1、該研究中,用免疫磁珠從來自腫瘤及相應(yīng)非癌性粘膜組織的單個細胞懸液中分離純化CD<'+><,8>、CD<'+><,4>T細胞及上皮細胞,從外周血中分離純化CD<'+><,8>、CD<'+><,4>T細胞,提取總RNA,應(yīng)用高度敏感的RT-PCR技術(shù)對胃癌病人體內(nèi)細胞因子的表達及腫瘤浸潤T淋巴細胞受體池進行了分析.第一部分,胃癌病人體內(nèi)細胞因子的表達.以β-actin作內(nèi)對照,用半定量PCR（引物為各細胞因子特異的）技術(shù)檢測分別來自胃癌組織

2、、相應(yīng)非癌性粘組織及外周血的純化CD<'+><,8>和CD<'+><,4>T細胞以及純化的癌性及非癌性上皮細胞中的Th1型/Th2型和TNF-α、TGF-β等細胞因子.該研究顯示胃癌局部處于免疫抑制狀態(tài),胃癌組織中細胞因子的表達與HP感染、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否有一定關(guān)系;在相同來源的不同的細胞亞群中細胞因子的表達有所不同.這些發(fā)現(xiàn)可能為胃癌免疫治療方案的制定提供參考.第二部分,胃癌病人體內(nèi)T細胞受體池的分析.以TCRCβ作內(nèi)對照,用半定量PC

3、R（引物分別為24個TCRVβ亞家族特異的）技術(shù)檢測了來自胃癌組織的純化CD<'+><,8>和CD<'+><,4>T細胞的TCRVβ基因（以非癌性粘膜組織作對照）.該研究結(jié)果顯示,在胃癌局部存在針對自體癌細胞的T細胞反應(yīng),提示HP感染和胃癌的病理分型與優(yōu)勢表達在不同的TCRVβ亞家族的分布有一定關(guān)連.研究還顯示不同的T細胞亞群中優(yōu)勢表達的TCRVβ亞家族也不同.進一步的研究可從優(yōu)勢表達的TCRVβ亞家族中發(fā)現(xiàn)特異性更強的胃癌相關(guān)的TCR