RNA干擾抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞HMGA1基因表達(dá)對放射敏感性的影響.pdf

1、S u p p r e s s i o n o f b r a i ng l i o m a c e l l se x p r e s s i o no fH M G A 1b y．1 e n t i v i r u s ．m e d i a t e dR N A i a n d i t se f | f e c to n1 ● ●』● ●or a d l 0 S e n S l t l V l t VA D i s s e r t a

2、 t i o nS u b m i t t e dt oS o u t h e a s t U n i V e r s i t yF o r t h eM a s t e r D e g r e e o f M e d i c i n eB YX i a o Ⅵ廠e iS u p e r V i s e db V 3 U p e r V l S e ( 1b VA s s o c i a t eP r o f e s s o r S u

3、 nX i n ．c h e nS c h o o lo f m e d i c i n eS o u t h e a s t U n i V e r s i t yM a y 2 0 1 O中文摘要R N A 干擾抑制腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞H M G A l基因表達(dá)對放射敏感性的影響東南大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院研究生：肖褲 導(dǎo)師：孫新臣中文摘要目的：探討慢病毒介導(dǎo)的R N A 干擾沉默H M G A l 基因表達(dá)對腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株S H G ．4 4 放射

4、敏感性的影響。方法：將前期制備的H M G A l s i R N A 慢病毒質(zhì)粒及陰性s i R N A 慢病毒質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株S H G 一4 4 ，將細(xì)胞分為三組：轉(zhuǎn)染組( 轉(zhuǎn)染H M G A l s i R N A 的細(xì)胞) 、質(zhì)粒對照組( 轉(zhuǎn)染陰性s i R N A 的細(xì)胞) 和未轉(zhuǎn)染組( 未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞) 。半定量I m P C R 和W e s t e mb l o t t i n g 檢測R N A 干擾后對細(xì)胞

5、H M G A l 基因表達(dá)的影響。使用6M V X 線同時(shí)照射三組細(xì)胞后，克隆形成法檢測各組細(xì)胞對X 線的敏感性；流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期。結(jié)果：R T - P c R 和w e s t e n l b l o t t i n g 顯示轉(zhuǎn)染組細(xì)胞存在H M G A l 基因表達(dá)下調(diào)：H M G A l m R N A 的表達(dá)量轉(zhuǎn)染組( O ．1 l ±O ．0 2 ) 明顯低于質(zhì)粒對照組( 0 ．8 5

6、77;0 ．0 1 ) 和未轉(zhuǎn)染組( O ．8 9 ±0 ．0 2 ) ；H M G A l 蛋白的表達(dá)量轉(zhuǎn)染組( 0 ．1 8 ±0 ．0 2 ) 明顯低于質(zhì)粒對照組( 1 ．0 3 ±O ．0 1 ) 和未轉(zhuǎn)染組( 1 ．1 3 ±O ．0 3 ) 。轉(zhuǎn)染組細(xì)胞較質(zhì)粒對照組細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染組細(xì)胞對6M V X 線的敏感性增加，增敏比為1 ．6 2 和1 ．7 3 ；轉(zhuǎn)染組凋亡率( 3 7 ．4 士

7、3 ．1 ) ％顯著高于質(zhì)粒對照組( 7 ．釷O ．6 ) ％和未轉(zhuǎn)染組( 6 ．1 土O ．5 ) ％，( 氏O ．0 1 ) ；轉(zhuǎn)染組細(xì)胞周期存在G o ／G l 期延遲( 7 2 ．6 ％士2 ．4 ％) 顯著高于質(zhì)粒對照組( 4 7 ．2 士2 ．O ) ％和未轉(zhuǎn)染組( 4 5 ．2 士1 ．6 ) ％，( 氏O ．0 1 ) 。結(jié)論：H M G A l s i R N A 能特異性下調(diào)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株s H G 4 4 中H M