應用RNA干擾技術抑制膠質瘤PLK1基因表達的實驗研究.pdf

1、第一部分 膠質瘤PLK1的表達與增殖活性及預后的關系 目的:檢測人膠質瘤組織上Polo樣激酶1(PLK1)的表達,探討PLK1表達與膠質瘤增殖活性、臨床病理、患者年齡、腫瘤大小和預后的關系.方法:應用免疫組織化學方法檢測47例膠質瘤和4例正常腦組織中PLK1和增殖細胞核抗原(PCNA)的表達,并隨訪病人.分析PLK1與膠質瘤細胞增殖活性、惡性程度、年齡、腫瘤大小和預后的關系.第二部分 攜帶EGFP的shPNA真核表達載體的構建 目的:構

2、建攜帶EGFP的短發(fā)夾環(huán)RNA(shRNA)真核表達載體.結論:成功構建攜帶EGFP的shRNA真核表達載體.第三部分 PLK1基因沉默對U251膠質瘤生長的抑制作用 目的:將設計合成的短發(fā)夾狀RNA(short hairpin RNA,shRNA)導入該課題構建的真核表達載體中,使其在細胞內高效轉錄,觀察shRNA對U251細胞PLK1的抑制作用,及其對細胞凋亡和細胞周期的影響,探討PLK1在膠質瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用和RNA干擾技術在

3、人膠質瘤細胞株中的應用,尋找更為有效的膠質瘤治療途徑.第四部分 pEGFP-H1載體介導的VEGF shRNA治療人膠質瘤的實驗研究 目的:構建針對血管內皮生長因子(VEGF)的短發(fā)夾環(huán)RNA質粒(pEGFPH1/VEGF),觀察其在體內外對膠質瘤細胞株U251生長的抑制作用.第五部分 GDNF/EGFP融合基因修飾的骨髓基質干細胞對多巴胺能神經元的保護作用 目的:構建膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(glial cell line-deriv