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1、背景:由于再生能力有限,心肌梗死(MI)后存活的心肌細胞不能修復(fù)梗死區(qū)。目前,生物學治療缺血性心肌病是一種潛在的方法,但細胞移植和基因治療的聯(lián)合應(yīng)用仍有爭議。本實驗在豬心梗模型上自體移植經(jīng)5-氮胞苷(5-aza)體外誘導(dǎo)、轉(zhuǎn)化生長因子(pTGF-β3)基因體外轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs),探討移植的MSCs能否在梗死區(qū)存活、向心肌方向分化,以及梗死后心功能和心肌灌注是否得到改善,并探討其機理。 第一部分豬心肌梗死模型的建立
2、 目的經(jīng)心導(dǎo)管用明膠海綿栓子栓塞豬的冠狀動脈左前降支(LAD),建立心肌梗死的大動物模型?! 〉诙糠重i骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)的分離、培養(yǎng)及體外轉(zhuǎn)化為心肌樣細胞的實驗研究 目的建立豬骨髓間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)及轉(zhuǎn)化為心肌樣細胞的方法,為細胞心肌成形術(shù)提供新材料。 方法豬的骨髓MSCs分離純化后,流式細胞儀檢測細胞周期;用5-氮胞苷(5-aza)誘導(dǎo)后,用抗結(jié)蛋白(desmin)、肌球蛋白重鏈(MHC)、心肌特異性肌鈣蛋白I
3、(cTnI)、連接蛋白-43(Cx-43)進行免疫細胞化學染色鑒定?! 〉谌糠重i轉(zhuǎn)化生長因子(pTGF-β3)cDNA的克隆及其在心肌樣細胞中的表達 目的克隆豬轉(zhuǎn)化生長因子(pTGF-β3)基因并體外轉(zhuǎn)染豬的心肌樣細胞,研究轉(zhuǎn)染細胞表達pTGF-β3的情況?! 〉谒牟糠重i骨髓MSCs自體移植治療心肌梗死的實驗研究 目的在豬的心梗模型上研究自體移植的骨髓MSCs能否持續(xù)存活和向心肌分化并改善心功能,并探討MSCs和基因聯(lián)合應(yīng)
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