CYP3A4-3A5、ABCB1基因多態(tài)性與卡馬西平、奧平西平及其主要代謝物血藥濃度的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:建立高效液相法同時(shí)測(cè)定人血漿中卡馬西平、奧卡西平及其主要代謝物10，11-環(huán)氧卡馬西平、利卡西平濃度的方法，并研究CYP3A4/3A5、ABCB1基因多態(tài)性與卡馬西平、10，11-環(huán)氧卡馬西平、奧卡西平及利卡西平血藥濃度的相關(guān)性。
　　方法:
　　1.收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院門診及住院服用卡馬西平及奧卡西平的癲癇患者，登記他們的臨床資料并抽取清晨靜脈血2ml，按入選、排除標(biāo)準(zhǔn)篩選后入組，分為單藥組和合并用藥組，單藥組患者僅

2、服用卡馬西平或奧卡西平，合并用藥組患者服用卡馬西平（奧卡西平）及其他的抗癲癇藥物，兩組患者合稱總和組。
　　2.采用高效液相法測(cè)定血漿中卡馬西平、10，11-環(huán)氧卡馬西平，奧卡西平、利卡西平的血藥濃度;用苯酚-氯仿法提取全血基因組DNA;多重連接酶法對(duì)CYP3A4 rs4646440、rs2242480，CYP3A5rs15524、rs776746, ABCB1 rs1045642、rs2032582、rs10234411、rs1

3、1285038個(gè)SNPs位點(diǎn)進(jìn)行基因分型。
　　3.采用x2檢驗(yàn)計(jì)算樣本的基因型頻率及計(jì)數(shù)資料之間的差異，t檢驗(yàn)、單因素方差分析比較組間計(jì)量資料的差異，多元線性回歸考察影響劑量、血藥濃度（包括原藥濃度、代謝物濃度、總濃度）的臨床因素，PLINK分析SNPs、單體型與校正后血藥濃度的關(guān)聯(lián)。
　　結(jié)果:
　　1.建立了同時(shí)測(cè)定卡馬西平、10，11-環(huán)氧卡馬西平、奧卡西平及利卡西平血藥濃度的高效液相方法?？R西平、10，11

4、-環(huán)氧卡馬西平、奧卡西平及利卡西平的色譜峰不受血漿中內(nèi)源性物質(zhì)的干擾，在線性范圍內(nèi)線性良好(R2＞0.9994)，回歸方程分別是Y=0.0795254X-0.00128006、Y=0.0255575X-0.00102140、Y=0.0519381X-0.00246967、Y=0.0239854X-0.000662765，各待測(cè)樣品的日內(nèi)、日間RSD0.50％-16.67％，相對(duì)回收率90.7％-103.1％，絕對(duì)回收率90.0％-106

5、.8％。
　　2.共收集服用卡馬西平的癲癇患者88例、服用奧卡西平的癲癇患者69例，經(jīng)Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)，P值大于0.05，兩組樣本均具有群體代表性。
　　3.卡馬西平治療的單藥組中，SNPs、單體型與卡馬西平的各校正血藥濃度、CBE-EP/CBZ校正比值都不相關(guān)。
　　合并用藥組中，rs776746、rs15524與劑量校正的卡馬西平血藥濃度、總濃度相關(guān)（P=0.004、0.013、0.007、

6、0.012）;rs776746、rs15524與單位體重劑量校正的卡馬西平血藥濃度、總濃度顯著相關(guān)(P=0.005、0.009、0.010、0.009);rs1045642、rs10234411、單體型rs2032582-rs10234411 AT型與CBE-EP/CBZ校正比值相關(guān)(P=0.042、0.014、0.010)。
　　總和組中，rs776746與劑量校正的卡馬西平血藥濃度、總濃度相關(guān)（P=0.025、0.028），r

7、s15524與劑量校正的卡馬西平總濃度相關(guān)(P=0.039); rs15524-rs776746 GT型與劑量校正的卡馬西平血藥濃度、總濃度相關(guān)(P=0.028、0.036)，rs15524-rs776746 AC型與校正的總濃度相關(guān)(P=0.045); rs4646440-rs2242480 GT型與CBE-EP/CBZ校正比值顯著相關(guān)(P=0.002)。
　　4.奧卡西平治療的單藥組中，SNPs、單體型與奧卡西平的各校正后血藥

8、濃度都不相關(guān)。合并用藥組中，單體型rs2032582-rs10234411-rs1045642 GAA與劑量校正的利卡西平血藥濃度、總濃度相關(guān)（P=0.026、0.029）。總和組中，rs2032582與年齡、劑量校正的奧卡西平血藥濃度相關(guān)(P=0.016)。
　　結(jié)論:
　　1.本研究建立的同時(shí)測(cè)定卡馬西平、10，11-環(huán)氧卡馬西平、奧卡西平及利卡西平血藥濃度的高效液相方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、應(yīng)用性強(qiáng)，滿足臨床血藥濃度監(jiān)測(cè)的需要。