肝細(xì)胞癌中NGX6表達(dá)與血管生成及超聲造影特征的相關(guān)性研究.pdf

1、腫瘤血管生成取決于血管生成因子與抑制因子之間的平衡。這一平衡受原癌基因和抑癌基因的調(diào)節(jié)。肝細(xì)胞癌是一種多基因病變，基因方面的研究，可為肝細(xì)胞癌預(yù)防、診斷、治療及預(yù)后提供理論依據(jù)。NGX6基因是新克隆的一個(gè)鼻咽癌候選抑癌基因（基因登陸號(hào)：AF188239）。前期研究表明NGX6與腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)。超聲造影被譽(yù)為無(wú)創(chuàng)性微循環(huán)血管造影，是超聲醫(yī)學(xué)的最新進(jìn)展。本課題將分子生物學(xué)及影像技術(shù)結(jié)合，探討肝細(xì)胞癌NGX6基因表達(dá)和超聲造影與血管生成的關(guān)

2、系，對(duì)于從多方面認(rèn)識(shí)血管生成的規(guī)律及指導(dǎo)基因靶向治療有重要作用。 工作目的： 1、NGX6在肝細(xì)胞癌及癌旁組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。 2、NGX6在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與微血管密度（microvesseldensity，MVD）、微血管形態(tài)、VEGFmRNA的關(guān)系及其在血管生成中的作用。 3、肝細(xì)胞癌超聲造影特征與MVD、微血管形態(tài)、VEGF表達(dá)的關(guān)系以闡明血管生成及侵潤(rùn)轉(zhuǎn)移影像學(xué)的分子病理學(xué)基礎(chǔ)

3、。 4、肝細(xì)胞癌超聲造影特征與NGX6表達(dá)的關(guān)系，為尋找影響肝細(xì)胞癌血管生成靶點(diǎn)及侵潤(rùn)轉(zhuǎn)移影像學(xué)研究提供基因水平的理論依據(jù)。 資料與方法： 研究對(duì)象為2006年1月～2007年10月經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)的肝細(xì)胞癌患者45例，術(shù)前行超聲造影。采用AcusonSequoia512彩超儀，探頭頻率2.0～6.0MHz，造影軟件CPS（contrastpulsesequences），造影劑聲諾維（SonoVue）。錄制造影全過(guò)

4、程，予以QONTRAST-QRADIO軟件分析。術(shù)中取新鮮離體肝細(xì)胞癌標(biāo)本，應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)NGX6、VEGF在癌及癌旁組織（距離癌灶距離大于2cm的肝組織）表達(dá)，免疫組化及Western-blotting檢測(cè)VEGF在癌及癌旁組織表達(dá)。CD34顯示微血管，記錄MVD，觀測(cè)微血管形態(tài)。對(duì)肝細(xì)胞癌NGX6表達(dá)、VEGF、MVD、微血管形態(tài)特征和超聲造影聲像特征的關(guān)系統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果： 1、癌組織NGX6陽(yáng)性表達(dá)率35.

5、5％（16/45），癌旁組織陽(yáng)性表達(dá)率77.8％（35/45），癌及癌旁組織表達(dá)陽(yáng)性率組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=16.335P<0.01），癌組織NGX6表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（x2=5.237，P=0.022）有關(guān)。 2、NGX6在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與MVD（x2=3.919，P<0.05）、VEGFmRNA（x2=10.132，P<0.01）相關(guān)聯(lián)，與微血管形態(tài)無(wú)關(guān)。 3、肝癌超聲造影達(dá)峰時(shí)間與VEGF（rs=-0.335

6、），MVD（rs=-0.477）有關(guān)。峰值強(qiáng)度與VEGF（rs=0.566），MVD（rs=0.569）有關(guān)。 4、微血管分型不同組間變低時(shí)間有差異（t=2.059，P<0.05）。具有環(huán)條型微血管特征的肝細(xì)胞癌門(mén)脈相低增強(qiáng)、“快出”廓清模式發(fā)生率高于點(diǎn)線型，門(mén)脈相增強(qiáng)表現(xiàn)及廓清模式與微血管分型有關(guān)（x2=11.948，P<0.01，C=0.458）。 5、MVD高低與腫瘤強(qiáng)化邊緣特征（x2=7.032，P<0.01，C

7、=0.368），強(qiáng)化范圍變化（x2=5.38，P<0.05，C=0.327），癌栓強(qiáng)化特征（x2=4.148，P<0.05，C=0.291）發(fā)生有關(guān)；VEGF與腫瘤強(qiáng)化邊緣特征（x2=3.90，P<0.05，C=0.282），強(qiáng)化范圍變化（x2=6.544，P<0.05，C=0.356）癌栓強(qiáng)化特征（x2=7.039，P<0.01，C=0.368）發(fā)生相關(guān)。 6、NGX6mRNA表達(dá)與腫瘤強(qiáng)化邊緣特征（x2=10.499，P<0

8、.01，C=0.435），強(qiáng)化范圍變化（x2=5.867，P<0.05，C=0.34），癌栓強(qiáng)化特征（x2=6.749，P<0.01，C=0.361）發(fā)生有關(guān)。與廓清模式、放射狀滋養(yǎng)動(dòng)脈、強(qiáng)化是否完全等特征無(wú)關(guān)。 結(jié)論： 1、NGX6在肝細(xì)胞癌及癌旁組織有表達(dá)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，NGX6基因轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)降低或缺失在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生過(guò)程中起了重要作用。 2、NGX6可能參與肝細(xì)胞癌血管生成的調(diào)控，與微血管形態(tài)

9、無(wú)關(guān)。 3、肝細(xì)胞癌造影達(dá)峰時(shí)間、峰值強(qiáng)度可反映新生血管的狀況。微血管形態(tài)特征是肝細(xì)胞癌廓清模式，變低時(shí)間長(zhǎng)短及“門(mén)脈相增強(qiáng)表現(xiàn)”等超聲造影強(qiáng)化及灌注特征的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)之一。 4、肝細(xì)胞癌強(qiáng)化邊緣特征、強(qiáng)化范圍變化、癌栓強(qiáng)化特征與VEGF表達(dá)、MVD有關(guān)，將分子特征與超聲造影影像學(xué)特點(diǎn)聯(lián)系，為臨床上影像學(xué)方法判斷肝細(xì)胞癌血管生成及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 5、NGX6mRNA表達(dá)與肝細(xì)胞癌強(qiáng)化邊緣特征，強(qiáng)化范圍變化，