JAK2-STAT3信號(hào)通路對(duì)非小細(xì)胞肺癌血管生成影響的研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　 肺癌是世界上惡性腫瘤死亡率最高的疾病，其中非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）所占比例高達(dá)85％，大部分患者診斷時(shí)已出現(xiàn)遠(yuǎn)處侵襲和轉(zhuǎn)移。在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的過(guò)程中，微血管的生成起到了非常重要的作用。既往研究證實(shí)腫瘤組織中JAK2/STAT3信號(hào)通路與微血管的生成密切相關(guān)，活化JAK2/STAT3通路能夠上調(diào)血管生成因子表達(dá)。但是目前并不清楚肺癌組織中該信號(hào)通路對(duì)血管生成相關(guān)因子VEGF、bFGF表達(dá)的影響及詳細(xì)的分子機(jī)

2、制。
　　 研究方法：
　　 1.應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NSCLC和正常肺組織中JAK2/STAT3信號(hào)通路和血管生成相關(guān)因子VEGF、bFGF的表達(dá)情況以及微血管密度(MVD)值，分析其與臨床資料各參數(shù)之間的相關(guān)性，以及與生存期之間的關(guān)系。
　　 2.使用不同濃度的JAK2抑制劑AG490處理人肺癌細(xì)胞A549和NCI-H292后， MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖狀態(tài)；Western印跡法檢測(cè)JAK2/STAT3信號(hào)

3、通路的活化狀態(tài)；RT-PCR法檢測(cè)AG490對(duì)VEGF、bFGF mRNA的表達(dá)的影響；ELISA檢測(cè)了AG490干預(yù)后VEGF、bFGF蛋白表達(dá)變化。
　　 3. 在人肺癌細(xì)胞A549和NCI-H292中轉(zhuǎn)染STAT3 siRNA， Western印跡法檢測(cè)STAT3及pSTAT3蛋白的表達(dá)；RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染STAT3 siRNA 后細(xì)胞中VEGF、bFGF mRNA的表達(dá)的變化；ELISA檢測(cè)了STAT3 siRNA

4、對(duì)VEGF、bFGF蛋白表達(dá)的影響。
　　 研究結(jié)果：
　　 1.NSCLC組織中JAK2/STAT3信號(hào)通路中的相關(guān)蛋白、VEGF、bFGF的表達(dá)以及MVD值均與腫瘤組織的惡性程度相關(guān)； pSTAT3蛋白的表達(dá)與VEGF和bFGF的表達(dá)成正相關(guān)。多因素統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示MVD值可以作為判斷NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立因素，MVD值高的患者預(yù)后差。
　　 2.AG490處理人肺癌細(xì)胞后能夠降低JAK2和STAT3蛋白的

5、磷酸化水平，阻斷JAK2/STAT3通路的活化，VEGF和bFGF的mRNA的表達(dá)下降，并且其蛋白水平也下降。
　　 3.人肺腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染STAT3 siRNA后，總的STAT3蛋白明顯減少，pSTAT3蛋白水平下降，VEGF和bFGF mRNA的表達(dá)量和蛋白水平較對(duì)照組出現(xiàn)明顯降低。
　　 研究結(jié)論：
　　 1.NSCLC組織的JAK2/STAT3通路的是異常持續(xù)活化的，該通路的活化與VEGF和bFGF的表達(dá)相