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文檔簡介
1、目的:
(1)探討脊柱關(guān)節(jié)炎患者膝關(guān)節(jié)積液中單核巨噬細胞未折疊蛋白反應(yīng)相關(guān)基因表達及其意義。
(2)檢測關(guān)節(jié)積液IL-23、IL-17的表達量,并分析其與未折疊蛋白反應(yīng)的聯(lián)系。
方法:
(1)選有明確的膝關(guān)節(jié)受累、并伴有明顯的關(guān)節(jié)腔積液的脊柱關(guān)節(jié)炎(SpA)患者18例、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者12例、骨關(guān)節(jié)炎(OA)患者6例,行膝關(guān)節(jié)穿刺抽取患者的關(guān)節(jié)積液,離心后將關(guān)節(jié)液分為上清液和細胞沉淀兩部分
2、。以磁珠分選法分離沉淀細胞中的單核巨噬細胞,實時定量PCR檢測單核巨噬細胞中的UPR相關(guān)分子編碼基因的mRNA,包括BiP、GRP94、CHOP、GADD34、XBP-1及ERdj4。比較三組間UPR相關(guān)基因表達的差異。
(2)實時定量PCR檢測編碼IL-23p19、IL-12/23p40兩個亞單位的mRNA,比較三組間IL-23表達的差異,并分析IL-23與UPR相關(guān)分子及患者一般資料的聯(lián)系。ELISA法檢測關(guān)節(jié)液上清部分的
3、IL-17水平,比較三組間IL-17的差異,并分析IL-17與其他臨床及實驗室資料的聯(lián)系。
結(jié)果:
(1)與OA組相比,SpA組的BiP、GRP94、XBP1的表達均明顯升高[BiP為(6.06±2.08)×10-2與(1.11±0.72)×10-2,GRP94為11.8(7.3~38.4)×10-3與1.27(1.02~4.18)×10-3,XBP1為(12.7±5.2)×10-3與(4.14±2.56)×10-3
4、],P值均<0.01;SpA與RA組相比,除RA組高表達GADD34之外[7.30(5.56~15.4)與21.3(12.2~27.6),P=0.009],其他指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異。而HLA-B27陽性的SpA患者與B27陰性SpA患者相比,各項UPR相關(guān)基因的表達均無統(tǒng)計學(xué)差異。
(2)與OA組相比,SpA組IL-23p19的mRNA明顯升高[(7.06±3.58)×10-5與(2.93±1.65)×10-5,P=0.013]
5、,而IL-12/23p40的表達在三組間無明顯差異?;貧w分析顯示IL-23p19的水平隨著XBP-1(β=0.006,P<0.001)及IL-12/23p40(β=1.417,P<0.001)的上升而上升,隨著GRP94(β=-0.001,P=0.016)的上升而下降。與OA組相比,SpA組的IL-17水平均明顯升高[14.86(5.83~43.14)pg/mL與0.51(0.00~4.03)pg/mL,P<0.01]。經(jīng)回歸分析看出I
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