負向免疫調控分子TREM-2在肺癌發(fā)病中作用及機制的研究.pdf

1、近年來，隨著對免疫抑制性細胞、負向免疫調節(jié)分子以及負向免疫調節(jié)機制認識的加深，針對負向免疫調節(jié)而開展的肺癌免疫治療研究備受矚目。髓系細胞觸發(fā)受體-2（Triggering receptor expressed on myeloid cells-2，TREM-2）能夠通過DAP-12傳遞抑制性免疫信號下調樹突狀細胞、巨噬細胞等抗原提呈細胞的吞噬功能以及促炎細胞因子的釋放，進而抑制炎癥反應，提示其可作為負向調節(jié)分子參與調控免疫應答。本研究通

2、過流式細胞術、RT-PCR以及免疫組化等實驗技術檢測肺癌患者外周血單核細胞和肺癌組織中TREM-2的表達情況，并結合荷瘤小鼠模型和細胞共培養(yǎng)等體內外實驗探討腫瘤微環(huán)境能否誘導樹突狀細胞(DC)表達TREM-2以及TREM-2介導的免疫抑制信號在肺癌細胞逃逸機體免疫攻擊中的作用。我們發(fā)現(xiàn):1、與健康對照者比較，肺癌患者外周血中TREM-2+單核細胞的比例以及單核細胞膜表面TREM-2的表達豐度均明顯增高，且肺癌患者瘤內組織和瘤旁組織中巨噬

3、細胞TREM-2的表達豐度高于其他良性病變者。2、將3LL肺癌細胞株的培養(yǎng)上清（模擬腫瘤微環(huán)境）添加到DC原代培養(yǎng)體系中可誘導DC膜表面TREM-2的表達。應用CD11c+免疫磁珠陽性分選上述條件下培養(yǎng)的DC（包括TREM-2+DC和TREM-2-DC）能夠抑制T細胞的活化和增殖，但是，先以TREM-2+免疫磁珠陰性分選再以CD11c+免疫磁珠陽性分選的DC(TREM-2DC)對T細胞活化、增殖的抑制作用則明顯減弱。3、流式細胞儀分選出

4、的TREM-2+CD11c+DC能夠抑制NK細胞對Yac-1細胞的殺傷作用。4、原位3LL肺癌模型小鼠肺組織中TREM-2+CD11c+DC的數(shù)量明顯增加。5、體外細胞實驗及動物模型中分離到的TREM-2+DC，通過檢測發(fā)現(xiàn)其表面MHCⅡ分子Ⅰa和CD80、CD86的表達下降，在體外經(jīng)LPS刺激后IL-12的分泌減少，而IL-10的產生增加。這表明TREM-2可通過負向調節(jié)荷瘤宿主機體的免疫功能，促進肺癌細胞的免疫逃逸。本研究為肺癌免疫