駐極體促進(jìn)胰島素經(jīng)皮吸收及其機(jī)制的研究.pdf

1、糖尿病是以慢性高血糖為癥狀的自身代謝紊亂性疾病，已成為繼心腦血管疾病和腫瘤之后危害人類健康的“第三殺手”。目前針對糖尿病患者的治療藥物主要有胰島素和非胰島素類藥物，胰島素是當(dāng)前糖尿病病人控制血糖最常用的藥物，臨床上通常采用皮下注射的方式給藥以獲得有效的降糖效果。但是，皮下注射不僅因疼痛不適等缺點給患者帶來不便和痛苦，導(dǎo)致患者的依從性差，而且長期頻繁注射還可引起患者皮下脂肪萎縮和低血糖等不良反應(yīng)。為此，非侵入性給藥方式，如胰島素經(jīng)皮給藥制

2、劑成為研究的熱點，它可有效避免藥物經(jīng)胃腸道及肝臟的首過效應(yīng)，提高患者用藥的順應(yīng)性，減輕患者的痛苦。因此，研究胰島素經(jīng)皮給藥具有非常重要的意義。
　　由于皮膚最外層角質(zhì)層的屏障作用，大多數(shù)藥物的經(jīng)皮轉(zhuǎn)運速度或程度都很小或有限，需要各種促滲方法的推動。課題組前期的研究結(jié)果表明，駐極體對水楊酸甲酯、利多卡因、美洛昔康和環(huán)孢菌素A等藥物具有顯著的經(jīng)皮促滲作用。因此，課題組在前期研究的基礎(chǔ)上，采用駐極體、化學(xué)促滲劑和駐極體與化學(xué)法促滲劑聯(lián)合

3、等方法對胰島素的經(jīng)皮給藥開展研究，探討駐極體促進(jìn)胰島素經(jīng)皮吸收的可行性及其相關(guān)機(jī)制，為探索駐極體促進(jìn)多肽類藥物的經(jīng)皮吸收研究提供一種新方法和新思路。
　　本課題從以下幾個方面開展了研究。
　　（一）駐極體對胰島素的極化及其規(guī)律的研究
　　應(yīng)用常溫柵控恒壓電暈充電系統(tǒng)制備了不同極性、不同表面電位的駐極體，作用于胰島素溶液和貼劑，測量施加在胰島素溶液和胰島素貼劑兩側(cè)的電場強度和壓電系數(shù)d33隨時間的變化規(guī)律，考察駐極體對胰

4、島素的極化及其規(guī)律。結(jié)果表明:(1)駐極體能夠為胰島素溶液及胰島素貼劑提供穩(wěn)定的靜電場。(2)駐極體能夠引起胰島素的極化，經(jīng)不同極性和不同表面電位駐極體作用12小時，胰島素的極化趨于飽和（即d33值趨于穩(wěn)定）。(3)駐極體的表面電位越大，引起胰島素的極化越明顯。
　　同時應(yīng)用核磁共振、傅里葉紅外吸收光譜和非變性凝膠電泳技術(shù)，進(jìn)一步研究了駐極體對胰島素分子結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果顯示胰島素經(jīng)駐極體作用后，其分子的空間結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生明顯改變，但

5、分子的部分微結(jié)構(gòu)發(fā)生細(xì)微變化，是駐極體電場引起胰島素分子極化的結(jié)果。
　?。ǘv極體、化學(xué)促滲劑及駐極體和化學(xué)促滲劑聯(lián)用對胰島素體外透皮規(guī)律的影響
　　借助Franz擴(kuò)散池和高效液相實驗技術(shù)，系統(tǒng)考察了3％氮酮、7.5％丙二醇化學(xué)促滲劑，±500V、±1000V、±1500V駐極體，±1500V駐極體聯(lián)用3％氮酮對胰島素的經(jīng)皮促滲作用，以及胰島素在角質(zhì)層和去角質(zhì)層皮膚中的滯留量。結(jié)果顯示，(1)氮酮和丙二醇對胰島素具有較好

6、的促滲作用，且3％氮酮的促滲效果明顯優(yōu)于7.5％丙二醇?；瘜W(xué)促滲劑作用胰島素體外透皮36h后，3％氮酮組的胰島素在角質(zhì)層和去角質(zhì)層皮膚中的分布量最大。(2)負(fù)極性駐極體對胰島素具有良好的體外促滲效果，且駐極體表面電位絕對值越高，對胰島素的促滲效果越好。駐極體作用后，胰島素在角質(zhì)層中的分布與對照組相比無明顯區(qū)別，但是在去角質(zhì)層皮膚中的分布明顯增加。(3)-1500V駐極體聯(lián)合3％氮酮，36小時后胰島素的累積透皮量分別是3％氮酮組、+150

7、0V駐極體聯(lián)合3％氮酮組和對照組的1.4倍、2.12倍和2.93倍。-1500V駐極體與3％氮酮聯(lián)合對胰島素具有很好的協(xié)同促滲作用。
　?。ㄈv極體對胰島素經(jīng)糖尿病大鼠皮膚的體外透皮規(guī)律研究
　　本文通過注射鏈脲佐菌素成功構(gòu)建了糖尿病大鼠模型，考察了胰島素溶液、經(jīng)-1500V、-1000V、-500V駐極體作用后的胰島素溶液對糖尿病大鼠皮膚的體外透皮規(guī)律。結(jié)果顯示，胰島素溶液經(jīng)糖尿病大鼠皮膚的透過量顯著高于正常皮膚的透過量

8、，36小時的累積透過量是經(jīng)正常皮膚透過量的3.2倍。36小時后，經(jīng)-1500V、-1000V、-500V駐極體作用后的胰島素溶液對糖尿病大鼠皮膚的累積透過量是經(jīng)正常皮膚透過量的4.00、3.86、3.54倍，表面電位絕對值越高，提高量越多。
　　（四）駐極體對正常大鼠和糖尿病皮膚顯微結(jié)構(gòu)的影響研究
　　利用免疫熒光技術(shù)和顯微結(jié)構(gòu)分析技術(shù)，研究了不同極性、不同表面電位駐極體作用正常和糖尿病大鼠的顯微結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示1）駐極體可使

9、正常大鼠皮膚的角質(zhì)層變薄，細(xì)胞間隙增大，毛囊口擴(kuò)大。2）駐極體作用糖尿病大鼠皮膚后，皮膚的角質(zhì)層及真皮層略微變厚，對其有修復(fù)作用。3）駐極體作用后的胰島素其主要經(jīng)皮途徑是皮膚的毛囊結(jié)構(gòu)。
　　（五）駐極體對胰島素降糖作用的影響
　　經(jīng)駐極體作用的胰島素溶液與未經(jīng)駐極體作用的胰島素溶液具有相似的降糖規(guī)律，經(jīng)+1000V駐極體和-1000V駐極體作用胰島素的降糖效果更佳。
　　駐極體胰島素經(jīng)皮給藥系統(tǒng)具有穩(wěn)定性好，使用方便