4-1BBL-B7-H3基因?qū)γ庖咧亟üδ躍CID荷瘤鼠的抑瘤作用.pdf

1、目的：建立人免疫重建荷口腔鱗癌重癥聯(lián)合免疫缺陷鼠（severe combined immune deficiency mice，SCID）嵌合模型,并探討4-1BBL-B7-H3基因在非特異性抗腫瘤免疫中的作用。
　　方法：將40只小鼠隨機分為5組（4雌+4雄為一組）。對照組(A組)：免疫重建+注射Tca8113細胞；Ad4-1BBL-B7-H3組（B組）：免疫重建+注射含有人4-1BBL-B7-H3基因腺病毒轉(zhuǎn)染的Tca8113

2、細胞；空載組（C組）：免疫重建+注射含有空載體腺病毒轉(zhuǎn)染的Tca8113細胞；非免疫重建組（D組)：不給予小鼠免疫重建，注射Tca8113細胞；非腫瘤組（E組）：免疫重建+背部皮下注射PBS。每周定期測量腫瘤體積；ELISA法檢測人IgG蛋白含量；流式細胞儀檢測SCID鼠外周血中人CD3+、CD56+NKT淋巴細胞比例;DAB顯色法觀察自然殺傷細胞2族成員D(natural killer group2 member D,NKG2D)和T

3、oll樣受體2(Toll-like receptor2,TLR2)在各組小鼠腫瘤中表達的差異;RT-PCR檢測腫瘤中4-1BBL-B7-H3mRNA的表達，RT-qPCR檢測腫瘤組織中主要組織相容性復(fù)合體1類相關(guān)分子A(major histocompatibility complex1 class related molecule A,M1CA)、主要組織相容性復(fù)合體1類相關(guān)分子B(major histocompatibility co

4、mplex1 class related molecule B,M1CB)和TLR2 mRNA的表達。
　　結(jié)果：①人4-1BBL-B7-H3組小鼠腫瘤體積小于其它組(P<0．05)，腫瘤生長明顯受到抑制；②第三、五、七周可在免疫重建組小鼠外周血中測得人IgG；③人4-1BBL-B7-H3組腫瘤中MICA和TLR2表達顯著增高，MICB的表達較余各組無顯著差異；④RT-PCR證明人4-1BBL-B7-H3基因在4-1BBL-B7-

5、H3組小鼠瘤體內(nèi)充分表達；⑤DAB顯色法觀察到人4-1BBL-B7-H3組小鼠腫瘤組織中NKG2D和TLR2的表達較其余各組明顯增高；⑥免疫重建鼠均能檢測到 CD3+、CD56+NKT細胞，人4-1BBL-B7-H3組高于其它組（P＜0.05）。
　　結(jié)論：4-1BBL-B7-H3基因在腫瘤組織的表達增強能成功誘導(dǎo)人CD3+、CD56+NKT細胞增殖，直接或間接活化TLR2，上調(diào)NKG2D及其配體MICA,MICB的表達，產(chǎn)生有效

6、的抗腫瘤免疫應(yīng)答。
　　目的：探討UCA1 mRNA在舌鱗狀細胞癌中的表達及其與舌鱗癌病理分級和臨床分期關(guān)系。
　　方法：采用SYBR Green II實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)試驗方法從6種基因中篩選出在40對舌鱗癌組織及配對正常舌組織樣本中表達有明顯差異的基因 UCA1，擴大樣本量至94例，檢測UCA1 mRNA在兩者中的表達。應(yīng)用SPSS13.0軟件包統(tǒng)計分析UCA1 mRNA表達量與舌鱗癌患者臨床病理學(xué)特征的關(guān)系