再生障礙性貧血患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a表達(dá)狀態(tài)的臨床資料分析.pdf

1、研究背景與目的
　　再生障礙性貧血（簡(jiǎn)稱再障）(aplasticanemia,AA)是一種獲得性人類骨髓衰竭綜合征，以全血細(xì)胞減少為臨床特征，其發(fā)病率約為為0.74/10萬人口。再障的發(fā)病呈明顯的異質(zhì)性和重疊性特征，目前認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制為免疫介導(dǎo)的1類細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的激活。再障的治療采用干細(xì)胞移植和免疫抑制藥物為主的綜合治療措施。MicroRNA(miRNA)是一種小保守非編碼RNA分子，主要在翻譯后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，對(duì)于正常

2、細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化、凋亡等功能的維持和多種免疫過程的調(diào)節(jié)起著至關(guān)重要的作用，目前已發(fā)現(xiàn)多種miRNA在免疫性血小板減少癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等多種免疫相關(guān)性疾病有異常表達(dá)。miRNA芯片檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-34a在再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞中有差異表達(dá)，其表達(dá)量高于正常對(duì)照。本研究的目的是探討miR-34a在各型再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞中表達(dá)狀態(tài)的臨床特點(diǎn)。
　　研究方法
　　我們選取了再障患者及健康對(duì)照者作為研究對(duì)

3、象。2012年3月至2013年9月期間于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院血液科病房和門診收集初診再障患者31例，皆符合國(guó)內(nèi)獲得性再障的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中非重型再障(NSAA)16例，重型再障(SAA)10例，極重型再障(VSAA)5例。14例健康者作為正常對(duì)照組(NC)。收集以上病例及健康對(duì)照組的臨床資料:一般資料包括年齡和性別，實(shí)驗(yàn)室檢查包括粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等。手工法分離31例再障患者及14例正常對(duì)照者骨髓T淋巴細(xì)胞，然后采用實(shí)時(shí)定

4、量熒光PCR測(cè)定其中的miR-34a的表達(dá)水平。采用SPSS17.0分析性別、年齡、再障嚴(yán)重程度、中性粒細(xì)胞(NEU)計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)計(jì)數(shù)、血小板(PLT)計(jì)數(shù)與miR-34a水平的關(guān)系。
　　研究結(jié)果
　　1.不同性別(P=0.5109)的再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平無顯著性差異。年齡與再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平無明顯相關(guān)(r=-0.2608,P=0.1565)。
　　

5、2.再障患者與健康對(duì)照骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平有顯著性差異（P＜0.0001），再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平明顯增高;且不同嚴(yán)重程度再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平皆明顯高于正常(VSAAvs.NC,P＜0.0001;SAAvs.NC,P＜0.0001;NSAAvs.NC,P＜0.0001)。對(duì)于不同嚴(yán)重程度AA患者之間骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平，VSAA與SAA(P=0.032

6、4)、VSAA與NSAA(P=0.0192)有顯著性差異，而SAA與NSAA無明顯差異(P=0.9054)。
　　3.再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平與再障的嚴(yán)重程度有相關(guān)性，且呈正相關(guān)關(guān)系(rs=0.451，P=0.011)。
　　4.再障患者NEU計(jì)數(shù)(r=-0.4279，P=0.0163)、RET計(jì)數(shù)（r=-0.3603，P=0.0465）與骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平皆有相關(guān)性，且呈負(fù)相關(guān)關(guān)系

7、，而PLT計(jì)數(shù)（r=-0.2005，P=0.2794）與骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平無明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論
　　我們的結(jié)果表明，再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞中miR-34a的表達(dá)水平是明顯高于正常對(duì)照的，且與性別和年齡無關(guān)。再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平與再障的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)關(guān)系。再障患者骨髓T淋巴細(xì)胞miR-34a的表達(dá)水平與NEU計(jì)數(shù)、RET計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，而與PLT計(jì)數(shù)無明顯相關(guān)。由此可以得出