2型豬鏈球菌葡萄糖酸-5-脫氫酶晶體結(jié)構(gòu)和功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、豬鏈球菌病,是一種人畜共患傳染病。每年對養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,尤其是1968年丹麥首次報道了人體感染豬鏈球菌導致腦膜炎的病例,更加引起人們的重視。目前全球有200余例豬鏈球菌感染病例報告。 豬鏈球菌根據(jù)熒膜多糖分類,可以分為35個血清型,其中2型豬鏈球菌是頻繁感染人和豬的血清型。2型豬鏈球菌基因組現(xiàn)已測序完畢,基因YP_001198591注釋為編碼葡萄糖酸-5-脫氫酶(gluconate 5-dehydrogenase,Ga

2、5DH),該酶屬于一種短鏈脫氫酶類家族。Ga5DH可催化葡萄糖酸(gluconate)和5-酮基葡萄糖酸(5-ketogluconate)之間的可逆轉(zhuǎn)變,從而調(diào)節(jié)體內(nèi)的碳源和再生NADP,維持機體內(nèi)的代謝平衡。這種糖酸的分解利用對豬鏈球菌定殖于宿主組織起著至關(guān)重要的作用。當宿主組織只提供來源有限的糖酸時,對D-葡萄糖酸的分解作用的能力將直接決定鏈球菌的存活及增殖。理解這種糖酸降解的詳細作用機制,如糖酸分解酶的結(jié)構(gòu)、作用過程等,設(shè)計相對應(yīng)

3、的抑制劑,對于預(yù)防和治療鏈球菌感染的疾病將極具理論價值。 本研究以2型豬鏈球菌葡萄糖酸-5-脫氫酶為研究對象,對基因利用生物信息學的方法初步確定所編碼蛋白,利用基因體外重組技術(shù)并在大腸桿菌中表達獲得較大量葡萄糖酸-5-脫氫酶,通過對葡萄糖酸-5-脫氫酶(gluconate5-dehydrogenase,Ga5DH)進行結(jié)晶篩選和優(yōu)化獲得質(zhì)量較好的晶體;進行X射線衍射實驗,獲得X射線衍射數(shù)據(jù);利用相關(guān)軟件解析了其三維精細結(jié)構(gòu),并通

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