百合高效再生體系的優(yōu)化及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的LlDREB1基因轉(zhuǎn)化.pdf

1、百合因其淡雅有致、清香襲人現(xiàn)多用于鮮切花和盆栽。但由于人為破壞，野生百合資源稀少日益嚴(yán)重，建立高效的百合再生體系顯得尤為重要。消費(fèi)者日益增加的需求使得百合多種性狀有待改良，百合育種方法較多，但傳統(tǒng)育種方法存在一些天然的缺陷，使得必須從分子育種方面尋求突破。現(xiàn)在多通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)入的方法對(duì)百合的性狀進(jìn)行改良，雖然已經(jīng)取得了一些進(jìn)展，但由于百合屬單子葉植物、遺傳背景復(fù)雜等原因，百合的遺傳轉(zhuǎn)化上還存在不少問題，如轉(zhuǎn)化后得到嵌合體比例較高、

2、PCR檢測(cè)假陽性率高、轉(zhuǎn)化效率低等。本研究利用麝香百合和淡黃花百合為材料，分別對(duì)其再生體系進(jìn)行了研究，并在此基礎(chǔ)上通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法對(duì)麝香百合進(jìn)行了目的基因的轉(zhuǎn)化。主要研究結(jié)果如下:
　　1.優(yōu)化了麝香百合的再生體系:麝香百合進(jìn)行叢生芽發(fā)生途徑時(shí)，以鱗片薄層切片為外植體，其再生最佳培養(yǎng)基:1.5MS+1.0mg/L BA+0.2mg/L NAA+90 g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂;以鱗片薄層切片和葉片為外植體，誘導(dǎo)麝香百合愈傷組

3、織最佳培養(yǎng)基均為:MS+1.0mg/L NAA+0.2mg/L TDZ+60 g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂，麝香百合愈傷組織分化培養(yǎng)基為基本MS培養(yǎng)基;進(jìn)行胚狀體發(fā)生途徑時(shí)，以鱗片薄層切片為外植體，誘導(dǎo)麝香百合胚性愈傷組織最佳培養(yǎng)基為:MS+2.0mg/LPIC+0.1 mg/L TDZ+60 g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂。
　　2.優(yōu)化了淡黃花百合的再生體系:淡黃花百合進(jìn)行叢生芽發(fā)生途徑時(shí)，以鱗片薄層切片為外植體時(shí)，其再生最佳培

4、養(yǎng)基:1.5MS+1.0mg/L BA+0.6mg/L NAA+90g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂;以鱗片薄層切片為外植體，誘導(dǎo)淡黃花百合愈傷組織最佳培養(yǎng)基:MS+1.0mg/L NAA+0.2mg/L TDZ+60 g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂。以葉片為外植體，誘導(dǎo)淡黃花百合愈傷組織最佳培養(yǎng)基:MS+0.5mg/L NAA+0.4mg/LTDZ+60 g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂，淡黃花百合愈傷組織分化培養(yǎng)基同樣為基本MS培養(yǎng)基。