野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基等位變異分析.pdf

1、小麥胚乳貯藏蛋白成分對小麥的品質(zhì)具有重要作用,尤其是占貯藏蛋白主要組分的小麥谷蛋白。小麥谷蛋白由高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)和低分子量谷蛋白亞基(LMW-GS)兩部分組成；HMW-GS與LMW-GS的含量及組成可直接影響小麥面粉的加工和烘烤品質(zhì)。本研究以由德國慕尼黑工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)中心分子遺傳室提供的175份野生二粒小麥為材料,利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)方法和質(zhì)譜技術(shù)對上述材料的HMW-GS組成進(jìn)行

2、鑒定和分析,以期鑒定和篩選一些新的谷蛋白亞基,為進(jìn)一步克隆優(yōu)質(zhì)蛋白基因奠定基礎(chǔ),為今后研究野生二粒小麥HMW-GS與小麥品質(zhì)的關(guān)系提供研究基礎(chǔ),并為探索利用野生二粒小麥上的特異HMW-GS改良小麥品質(zhì)的新途徑提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： HMW-GS的SDS-PAGE分離鑒定利用單向一步SDS-PAGE技術(shù)分析了供試材料的高分子量麥谷蛋白亞基等位變異,在Glu-1位點(diǎn)共檢測到36種變異類型,其中Glu-A1位點(diǎn)有4種類型：1

3、、1*、2*和Nu11,出現(xiàn)頻率分別為45.14％、2.86％、4.57％和47.43％；Glu-B1位點(diǎn)有32種類型,比普通小麥1B染色體上HMW-GS的變異類型豐富得多,其中7+8和14.1+15.1亞基分布頻率最高(20.00％),且有7個(gè)新亞基：1.1、5*、7*、12*、14.1、15.1和16*。供試小麥材料Glu-1位點(diǎn)的LMW-GS組合共有44種類型,以(null,14.1+15.1)組合為主要類型,占12.58％。該結(jié)

4、果為進(jìn)一步進(jìn)行小麥亞基研究與品質(zhì)改良提供了有意義的參考資料。 HMW-GS的MALDI-TOF-MS鑒定本研究對野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基采用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)鑒定技術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化,初步摸索出一套樣品用量少、操作簡便快速、適合高通量分析的技術(shù)體系。分析結(jié)果表明,15-20mg小麥種子樣品足夠進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。圖譜顯示,不同高分子量蛋白組分分辨度較好,圖譜清晰,分子量多集中在60-100kD