全反式維甲酸對食管癌細(xì)胞系EC109作用的研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文全反式維甲酸對食管癌細(xì)胞系EC109作用的研究姓名：楊成梁申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：樊青霞張明智20070501鄭州大學(xué)2007屈碩I：學(xué)位論文(摘要)全反式維甲酸對食管癌細(xì)胞系ECl09作用的研究終濃度分別為10Ltmol／L、5tamol／L、1弘mol／L、05pmol／L、O1umol／L，每一濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔。分別于加藥后培養(yǎng)24h、48h、72h、96h檢測各組細(xì)胞增殖抑制率的差異。(2)流式

2、細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及周期分布常規(guī)培養(yǎng)人食管癌細(xì)胞系ECl09細(xì)胞，對照組加入RPMI1640培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組加入ATRA使其終濃度為111mol／L。分別于更換新培養(yǎng)液后24h、48h、72h、96h收集各對照組和實(shí)驗(yàn)組的3瓶ECl09細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及周期分布情況。(3)RTPCR法檢測凋亡相關(guān)基因mRNA水平常規(guī)培養(yǎng)人食管癌細(xì)胞系ECl09細(xì)胞，對照組加入RPMI1640培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組加入ATRA使其終濃度為1umol／

3、L。分別于更換新培養(yǎng)液后24h、48h、72h、96h收集各對照組和實(shí)驗(yàn)組的3瓶ECl091細(xì)胞，采用RTPCR技術(shù)檢測凋亡相關(guān)基因bcl一2和baxmRNA表達(dá)情況。(4)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)SPSSll0統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用單因素方差分析，以ct=005為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果：(1)ATRA對ECl09細(xì)胞的抑制作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴效應(yīng)關(guān)系和時(shí)間依賴效應(yīng)關(guān)系，實(shí)驗(yàn)組與對照組之間及相鄰實(shí)驗(yàn)組之間的A值和抑制率相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸O05)。(

4、2)ECl09細(xì)胞經(jīng)過10umol／L的ATRA作用后，與對照組相比細(xì)胞出現(xiàn)凋亡峰，細(xì)胞周期發(fā)生明顯變化。隨藥物作用時(shí)間的增加凋亡率增高，Go／Gl期細(xì)胞比例增高，sG2／M期細(xì)胞比例下降，實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)與對照組。的比較和相鄰實(shí)驗(yàn)組間的比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO05)。(3)ECl09細(xì)胞經(jīng)過10umol／L的ATRA作用后，隨著藥物作用時(shí)間的不斷增加，bcl一2基因的mRNA水平表現(xiàn)出明顯的逐漸減弱趨勢，而bax基因的mRNA水平