AMP579與腺苷對大鼠缺血再灌注心肌及MMP-9作用的比較研究.pdf

1、研究背景：目前，心血管疾病占世界第一位死亡原因，而其中冠心病、急性心肌梗死(acutemyocardial infarction，AMI)的危害最為嚴(yán)重，死亡率極高。據(jù)WHO報告，到2020年急性冠脈閉塞將會成為世界上的主要死因。盡快恢復(fù)缺血缺氧心肌的血液灌注對于挽救瀕死心肌具有十分重要的意義。但是急性缺血心肌的再灌注也存在不利的一面，可加重缺血心肌的損傷，稱為心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia reperfus

2、ion injury，MIRI)。如何避免心肌再灌注損傷，縮小急性心肌梗死再灌注后心肌的梗死面積成為臨床迫切需要解決的問題。近年研究發(fā)現(xiàn)，明膠酶-B(即MMP-9)在心肌缺血再灌注損傷的發(fā)展過程中起著重要作用。AMP579作為一種新的人工合成的腺苷擬似物，具有作用強(qiáng)、半衰期長等特點(diǎn)，在心臟保護(hù)方面有其獨(dú)特的作用。 目的：本課題旨在研究AMP579與腺苷對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及對MMP-9的影響，并比較兩者作用的差別。

3、探討AMP579在缺血再灌注中的作用機(jī)制，以指導(dǎo)AMP579在臨床中的應(yīng)用。 方法：采用大鼠在體缺血再灌注(I/R)模型。健康雄性Wistar大鼠64只，隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組(Ⅰ)，缺血再灌注組(Ⅱ)，腺苷治療組(Ⅲ)和AMP579治療組(Ⅳ)。Ⅰ組(16只)：開胸只穿線不結(jié)扎血管，麻醉維持150min；Ⅱ組(16只)：結(jié)扎30min，再灌注120min；Ⅲ組(16只)：缺血30min，再灌注120min，再灌注開始前經(jīng)股靜脈

4、靜滴腺苷305ug/kg.min，持續(xù)5min；Ⅳ組(16只)：缺血30min，再灌注120min，再灌注開始前經(jīng)股靜脈靜滴AMP579305ug/kg.min，持續(xù)5min。Ⅰ組與Ⅱ組均于前述給予腺苷和AMP579的相同時間點(diǎn)于股靜脈緩慢靜滴等量生理鹽水，5min內(nèi)滴注完作為平衡對照。每組各隨機(jī)取出8只測定心肌梗死范圍，梗死范圍以壞死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。每組剩余8只以HE染色觀察心肌組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，并用免疫組化租RT-PCR

5、法測定MMP-9在心肌中表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.心肌梗死范圍測定結(jié)果：與假手術(shù)組(0)％相比，缺血再灌注組大鼠心梗范圍(37.24±1.53)％明顯增加，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與缺血再灌注組相比，腺苷治療組(22.52±2.21)％與AMP579治療組(17.59±1.39)％大鼠心梗范圍明顯減少，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且AMP579治療組作用明顯強(qiáng)于腺苷治療組(P＜0.05)。 2.MM

6、P-9免疫組織化學(xué)染色結(jié)果(IOD值)：與假手術(shù)組(1168.08±140.11)相比，缺血再灌注組(19639.79±283.57)MMP-9的陽性表達(dá)明顯增強(qiáng)，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與缺血再灌注組相比，腺苷治療組(12794.99±225.37)與AMP579治療組(8444.51±303.49)MMP-9的陽性表達(dá)明顯減弱，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且AMP579治療組又顯著低于腺苷治療組(P＜0.05)。

7、 3.MMP-9 RT-PCR結(jié)果：與假手術(shù)組(0.179±0.013)相比，缺血再灌注組(0.878±0.017)MMP-9 mRNA的表達(dá)明顯增強(qiáng)，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與缺血再灌注組相比，腺苷治療組(0.440±0.019)與AMP579治療組(0.302±0.022)MMP-9 mRNA的表達(dá)明顯減弱，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且AMP579治療組又顯著低于腺苷治療組(P＜0.05)。 結(jié)論：