黃芪多糖輔助抗癌作用的機制研究.pdf

1、目的:探討黃芪多糖（Astragalus polysaccharide APS）體內(nèi)外是否具有化療增敏作用及其可能機制。
　　方法:荷H22小鼠肝癌細胞株皮下移植瘤小鼠經(jīng)腹腔給以APS及ADM，觀察其體內(nèi)對移植瘤生長的影響及對昆明小鼠主要臟器的毒性。用ELISA方法檢測血清中IL-1a、IL-2、IL-6、TNF-α、IL-10等細胞因子的表達;用Western blot和熒光定量PCR檢測腫瘤組織中的P-GP和MDR1 mRNA

2、表達。體外用MTT法檢測APS單獨和協(xié)同化療藥對H22/ADM敏感性;用Western blot和熒光定量PCR檢測H22/ADM耐藥細胞株的P-GP和MDR1 mRNA表達;用R-123攝取實驗研究不同濃度APS對H22/ADM細胞P-GP功能的影響。
　　結(jié)果:各實驗組KM小鼠皮下接種部位成瘤率100％，荷H22小鼠肝癌細胞株皮下移植瘤模型成功;體內(nèi)實驗表明，在劑量50mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)APS能減輕ADM所導致

3、的KM小鼠體重下降，但對肝、心、腎、肺重量及其臟器系數(shù)無明顯影響。在劑量100mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)APS能減輕由AMD導致的胸腺減小，在劑量50mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)APS能減輕由AMD導致的脾臟減小。在劑量50mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)APS聯(lián)用ADM對荷瘤小鼠腫瘤生長有較強的抑制作用;在劑量50mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)，含APS組IL-1a、IL-2、IL-6、TNF-α等因子表達增加，而

4、IL-10因子表達減少，與ADM組比較均有顯著性差異(P＜0.05)，APS具有輔助ADM抗腫瘤作用機制之一可能與APS增加IL-1a、IL-2、IL-6、TNF-α等因子表達，而減少IL-10因子產(chǎn)生有關;在APS劑量50mg/kg～200mg/kg范圍內(nèi)MDR1 mRNA和P-GP的表達隨著APS劑量增加而減小，呈濃度依賴性。與ADM或ADM+RFP組比較，ADM+APS(200 mg/kg)組MDR1 mRNA和P-GP的表達明顯

5、減小(P＜0.05)。APS能下調(diào)MDR1 mRNA水平，減少P-GP表達，因此可能增加化療藥物在腫瘤細胞內(nèi)的濃度，這也許是APS增強ADM的化療敏感性，輔助ADM抗腫瘤作用的另一機制。體外研究發(fā)現(xiàn)，在終濃度0.8-500mg/mL范圍，APS對H22/ADM耐藥細胞株無抗腫瘤作用，但可增強5-Fu、DDP、VP-16或CTX等常用化療藥物對H22/ADM耐藥細胞株的化療敏感性;APS可以使R-123潴留增加，對P-GP外排功能表現(xiàn)為抑

6、制作用;APS下調(diào)MDR1 mRNA作用隨APS濃度增加而作用增強，呈濃度依賴性，APS各組MDR1 mRNA表達隨干預時間的延長而減少，均具有時間依賴性;在同一時間內(nèi)，APS下調(diào)P-GP表達隨APS濃度增加而增強，呈濃度依賴性，同一濃度的APS下調(diào)P-GP表達隨干預時間的延長而增強(72h＞48h＞24h)，呈時間依賴性。對于H22/ADM耐藥細胞株，APS下調(diào)MDR1 mRNA和P-GP的表達，抑制P-GP外排功能可能是APS增強耐