雷帕霉素抑制鎘誘導小鼠腦神經(jīng)細胞氧化應激和mTOR通路激活抗凋亡機理研究.pdf

1、本研究通過建立亞急性鎘染毒誘導小鼠模型，運用HE染色、透射電鏡、免疫組化和Western blotting等技術(shù)方法，研究了雷帕霉素在抗鎘誘導小鼠腦神經(jīng)細胞氧化應激和凋亡中的保護作用，探討雷帕霉素抑制鎘誘導小鼠腦組織mTOR通路激活抗凋亡機理，為雷帕霉素在防止鎘誘導的神經(jīng)變性疾病提供理論依據(jù)和科學指導。結(jié)果如下:
　　1雷帕霉素抑制鎘誘導小鼠腦神經(jīng)細胞氧化應激發(fā)揮抗凋亡保護作用
　　36只成年健康ICR雄性小鼠，實驗分為對照

2、組（0.9％生理鹽水）、雷帕霉素處理組（按7.5 mg/kg體重）、2個CdCl2處理組（分別按0.5和1 mg/kg體重）、2個雷帕霉素與CdCl2聯(lián)合處理組，共6組。實驗給藥采用腹腔注射方式，實驗周期11天。HE染色和透射電鏡分別觀察腦組織學和超微結(jié)構(gòu)變化，生化分析腦組織ROS、GSH、CAT水平變化，TUNEL染色評價腦神經(jīng)細胞凋亡狀態(tài)。結(jié)果顯示:鎘染毒小鼠腦顳葉皮層出現(xiàn)明顯的混亂，海馬區(qū)細胞排列松散，腦神經(jīng)元線粒體腫脹和內(nèi)嵴的斷

3、裂，而雷帕霉素能夠明顯削弱和保護這種改變。鎘誘發(fā)腦組織ROS升高以及GSH含量和CAT活性降低，這被雷帕霉素明顯改善。鎘誘導大腦皮層和海馬組織TUNEL陽性神經(jīng)細胞數(shù)量增加也被雷帕霉素顯著抑制。提示雷帕霉素可以通過抑制鎘誘導小鼠腦組織神經(jīng)細胞氧化應激發(fā)揮抗凋亡保護作用。
　　2雷帕霉素抑制鎘誘導小鼠腦組織mTOR通路激活發(fā)揮抗凋亡保護作用
　　36只成年健康ICR雄性小鼠，實驗分為對照組（0.9％生理鹽水）、雷帕霉素處理組（

4、按7.5 mg/kg體重）、2個CdC12處理組（分別按0.5和1 mg/kg體重）、2個雷帕霉素與CdCl2聯(lián)合處理組，共6組。實驗給藥采用腹腔注射方式，實驗周期11天。免疫組化分析4E-BP1磷酸化表現(xiàn)，Western blot分析Akt、S6K1、4E-BP1和caspase-3蛋白表達。結(jié)果顯示:免疫組化分析顯示，鎘染毒小鼠大腦皮層及海馬CA1區(qū)磷酸化4E-BP1(Thr70)陽性細胞數(shù)量明顯增加，Western blot分析展