線粒體氧化應(yīng)激信號(hào)通路參與缺糖缺氧誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、浙江大學(xué)藥學(xué)院碩士學(xué)位論文線粒體氧化應(yīng)激信號(hào)通路參與缺糖缺氧誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡調(diào)控機(jī)制研究姓名：劉璐璐申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：韓峰樓宜嘉20100101浙江大學(xué)碩I：學(xué)位論文中文摘要關(guān)注，但關(guān)于酪氨酸蛋白硝基化與線粒體氧化應(yīng)激損傷的內(nèi)在關(guān)聯(lián)性研究尚未闡明。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，Omi／HtrA2(oocytematurationinhibitor／thehightemperaturerequirementfactorA2)是一種線

2、粒體絲氨酸蛋白水解酶，當(dāng)細(xì)胞受到刺激發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)時(shí)線粒體膜通透性增加，并與x連鎖凋亡抑制蛋白(X1inkedinhibitorofapoptosisprotein，XIAP)等相互作用，繼發(fā)激活caspase原，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。XIAP的腦保護(hù)作用可能與其能夠直接與啟動(dòng)陛caspase(caspase9)和效應(yīng)一陛caspase(caspase一3、caspase7)結(jié)合并抑制其活性有關(guān)。此外，PED／pea15(phosphopro

3、teinenrichedindiabetes／phosphoproteinenrichedinastrocytes)的生物功能的多樣性和翻譯后調(diào)控及對(duì)Omi／HtrA2介導(dǎo)的下游細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)的制衡作用也被關(guān)注。目的：通過構(gòu)建缺糖缺氧(OxygenGlucoseDeprivation，OGD)內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型，探索內(nèi)皮損傷病理狀態(tài)下ONOO‘介導(dǎo)的酪氨酸硝基化與線粒體氧化應(yīng)激損傷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的內(nèi)在關(guān)聯(lián)性及線粒體Omi／HtrA2PED／p

4、ea15的平衡紊亂對(duì)下游細(xì)胞XIAPcaspases凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)的調(diào)控機(jī)制，并利用基因芯片技術(shù)對(duì)氧化應(yīng)激損傷后的多基因表達(dá)變化進(jìn)行探索性研究，為腦缺血疾病的預(yù)防及治療提供理論性研究依據(jù)。方法：在OGD條件下，分別處理內(nèi)皮細(xì)胞1h，3h，6h，12h和24h，然后通過MTT法分別檢測細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)；通過光鏡，透射電鏡，JC1(5，5’，6，6’tetrachloro一1，1’，3，3’tetraethylbenzimidazolylcarb