突觸相關(guān)蛋白在孤獨(dú)癥大鼠模型腦組織的研究.pdf

1、目的：本課題通過孤獨(dú)癥大鼠動(dòng)物模型的建立，了解神經(jīng)生長相關(guān)蛋白質(zhì)(Growth associated protein,GAP-43)、神經(jīng)粘附分子（Neural cell adhesion molecule1，CD56）及突觸素(synaptophysin,SYN)在孤獨(dú)癥動(dòng)物模型前額葉皮質(zhì)及海馬表達(dá)水平的研究，探索其與孤獨(dú)癥的相關(guān)性。
　　方法：1.通過對12.5天的孕鼠腹腔注射丙戊酸鈉（Valproate，VPA）的方法建立孤

2、癥大鼠的動(dòng)物模型，并用相關(guān)的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)評估孤獨(dú)癥模型的可靠性。評估主要包括孕鼠產(chǎn)對照組及模型組數(shù)量、形態(tài)、生長發(fā)育的檢測（體重、睜眼時(shí)間）及行為學(xué)測試（負(fù)向性檢測、自梳理實(shí)驗(yàn)、敞箱實(shí)驗(yàn)、三箱實(shí)驗(yàn)）。將孤獨(dú)癥模型組與對照組的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行對比，評估模型建造的成功與否。2.通過蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)方法，檢測GAP-43、CD56及突觸素在孤獨(dú)癥大鼠模型中的表達(dá)水平，通過免疫組織化學(xué)方法了解不同年齡的孤獨(dú)癥模型及對照組大鼠

3、額葉及海馬突觸素的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.比較孤獨(dú)癥模型組與對照組：與正常對照組相比，模型組涂片檢查光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果顯示大鼠精液涂片在低倍鏡下呈團(tuán)塊樣物質(zhì)，而在高倍鏡下精子則呈密集無規(guī)則分布、分頭尾兩部分，頭部呈鐮刀形，尾部細(xì)長;模型組產(chǎn)仔數(shù)量顯著降低;睜眼時(shí)間較早;方向感覺及運(yùn)動(dòng)機(jī)能等的總體發(fā)育水平遲緩;形態(tài)學(xué)上模型組大鼠其尾部呈卷曲畸形，且具有刻板、重復(fù)行為,這些表現(xiàn)與Schneider等人制作出的孤獨(dú)癥模型表現(xiàn)一致，這些

4、均表明利用VPA腹腔注射法較為成功的復(fù)制出了孤獨(dú)癥的動(dòng)物模型。2.Western blot結(jié)果顯示：孤獨(dú)癥模型組與對照組相比，GAP-43、CD56及突觸素在大鼠前額葉皮質(zhì)及海馬區(qū)均有表達(dá)。出生后當(dāng)日記為 P1，P14、P21及 P42時(shí)，前額葉皮質(zhì)及海馬中 GAP-43及突觸素的表達(dá)高于對照組(P<0.05)；P14、P21及P42時(shí)，前額葉皮質(zhì)及海馬中CD56表達(dá)模型組低于對照組(P<0.05)。3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：突觸素在大