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1、目的:多發(fā)傷的治療中常會(huì)涉及到肝缺血再灌注損傷,嚴(yán)重多發(fā)創(chuàng)傷后肝臟的缺血耐受性及手術(shù)時(shí)機(jī)的選擇是不確定的,本實(shí)驗(yàn)觀察多發(fā)骨折合并肝缺血再灌注損傷后肝缺血耐受性變化及不同骨折治療時(shí)機(jī)對(duì)肝損害的影響。
方法:采取動(dòng)物實(shí)驗(yàn),第一部分:建立多發(fā)骨折合并肝缺血再灌注損傷模型,72只SD大鼠隨機(jī)分成三組(每組18只),骨折(Fracture,F(xiàn))組、肝缺血再灌注損傷(Hepatic Injury,HI)組、骨折+肝損傷(Fractur
2、e+Hepatic Injury,F+HI)組。對(duì)照組為假手術(shù)(Sham)組(6只)。假手術(shù)組僅行腹部皮膚切開(kāi)并縫合皮膚:骨折組應(yīng)用自制雙股骨骨折造模支架致雙側(cè)股骨干骨折;肝損傷組行剖腹血管夾夾閉肝蒂30分鐘后再灌注造成肝缺血再灌注損傷;骨折+肝損傷組為多發(fā)骨折合并肝缺血再灌注損傷,模型制作完成后通過(guò)X線了解骨折類(lèi)型、移位情況,于造模成功后1、24、48、72h處死大鼠取肝臟應(yīng)用PCR方法檢測(cè)肝組織中TNF-a、IL-6、IL-10mR
3、NA表達(dá),髓過(guò)氧化物酶(MPO)含量,取腹主動(dòng)脈血檢測(cè)ALT、血乳酸水平,并行組織學(xué)檢查肝臟損傷情況。第二部分:將32只雄性SD大鼠隨機(jī)分成4組(每組動(dòng)物各8只):骨折早手術(shù)(Fracture Early Surgery,FES)組、骨折晚手術(shù)(Fracture Later Surgery,FLS)組、骨折+肝損傷早手術(shù)(Fracture+Hepatic Injury Early Surgery,F(xiàn)+HIES)組、骨折+肝損傷晚手術(shù)(F
4、racture+Hepatic Injury Later Surgery,F+HILS)組。早期手術(shù)為傷后1h內(nèi)骨折髓內(nèi)釘治療,晚期手術(shù)為損傷后先用夾板固定骨折端72h后骨折髓內(nèi)釘治療。骨折治療完成后6h應(yīng)用PCR方法檢測(cè)肝組織中TNF-a、IL-6、IL-10mRNA表達(dá),檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶(MPO)含量,取腹主動(dòng)脈血檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、血乳酸(LD),肝組織常規(guī)固定,HE染色后光鏡檢查。
結(jié)果:
第一
5、部分:模型制作完成后行X線攝片證實(shí)雙側(cè)股骨干骨折均為閉合性中段橫斷骨折,骨折移位明顯。骨折組、肝損傷組、骨折+肝損傷組大鼠血ALT、LD,肝臟MPO在1h升高,24h達(dá)到高峰,48h、72h下降,骨折+肝損傷組較骨折組、肝損傷組增高明顯(P<0.05)。骨折組、肝損傷組、骨折+肝損傷組肝臟TNF-amRNA表達(dá)在1h升高,24h達(dá)到高峰,48h、72h下降;骨折+肝損傷組較骨折組、肝損傷組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均增高明顯(P<0.05);骨折組、肝
6、損傷組、骨折+肝損傷組肝臟IL-6mRNA表達(dá)在1h、24h升高,48h達(dá)到高峰,72h下降。骨折+肝損傷組較骨折組、肝損傷組增高明顯(P<0.05);骨折組、肝損傷組、骨折+肝損傷組肝臟IL-10mRNA表達(dá)在1h、24h、48h升高,72h達(dá)到高峰。骨折+肝損傷組較骨折組、肝損傷組增高明顯(P<0.05)三組大鼠肝臟病理切片顯示肝竇充血、肝細(xì)胞腫脹、炎性細(xì)胞浸潤(rùn),骨折+肝損傷組較其他兩組肝細(xì)胞壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)顯著。
7、第二部分:骨折+肝損傷早手術(shù)組肝臟TNF-a、IL-6、IL-10mRNA表達(dá)含量、MPO含量、血ALT、血LD水平明顯高于骨折早手術(shù)組、骨折晚手術(shù)組、骨折+肝損傷晚手術(shù)組(P<0.05)。骨折早手術(shù)組肝臟TNF-a、IL-6、IL-10mRNA表達(dá)含量、MPO含量、血ALT、血LD水平與骨折晚手術(shù)組比較差異較小。骨折+肝損傷早手術(shù)組肝臟充血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、細(xì)胞壞死等病理學(xué)改變顯著。
結(jié)論:多發(fā)骨折合并肝缺血再灌注損傷后肝臟
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